[发明专利]柯萨奇病毒A6病毒样颗粒在昆虫细胞中的制备及其应用

权利要求书

1.一种分离的经密码子优化的多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸编码柯萨奇A6病毒P1蛋白；并且所述多核苷酸为序列如SEQ ID NO.3所示的多核苷酸。

2.一种表达载体，其特征在于，所述表达载体含有权利要求1所述的多核苷酸。

3.如权利要求2所述的表达载体，其特征在于，所述表达载体还包括编码柯萨奇A6病毒3CD蛋白的多核苷酸序列。

4.如权利要求2所述的表达载体，其特征在于，所述表达载体包括第一表达盒和第二表达盒，所述第一表达盒包括SEQ ID NO.3所示的多核苷酸或其互补序列；所述第二表达盒包括SEQ ID NO.6所示的多核苷酸或其互补序列。

5.如权利要求2所述的表达载体，其特征在于，所述表达载体为重组杆状病毒。

6.如权利要求4所述的表达载体，其特征在于，所述第一表达盒还包括启动子，所述启动子位于SEQ ID NO.3所示的多核苷酸的上游；和/或，所述第二表达盒还包括启动子，所述启动子位于SEQ ID NO.6所示的多核苷酸的上游。

7.如权利要求6所述的表达载体，其特征在于，所述启动子位于SEQ ID NO.3所示的多核苷酸的上游，并且所述启动子为AcMNPV p10启动子。

8.如权利要求6所述的表达载体，其特征在于，所述启动子位于SEQ ID NO.6所示的多核苷酸的上游，并且所述启动子为polyhedrin启动子。

9.一种宿主细胞，其特征在于，所述的宿主细胞含有权利要求2所述的表达载体，或者在基因组中整合有权利要求1所述的多核苷酸。

10.一种柯萨奇病毒A6病毒样颗粒(VLP)，其特征在于，所述病毒样颗粒由权利要求9所述的宿主细胞表达。

11.一种制备柯萨奇病毒A6 VLP的方法，其特征在于，包括步骤：

在适合表达的条件下，培养权利要求9所述的细胞，从而表达出权利要求10所述的病毒样颗粒(VLP)；和

分离所述病毒样颗粒(VLP)。

12.一种药物组合物，其特征在于，所述的组合物含有权利要求4所述的病毒样颗粒(VLP)、权利要求1所述的多核苷酸或者权利要求2所述的表达载体或者权利要求3所述的宿主细胞，以及药学上可接受的载体和/或辅料。

13.如权利要求12所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包括疫苗组合物。

14.如权利要求13所述的药物组合物，其特征在于，所述的疫苗组合物还含有佐剂。

15.如权利要求14所述的药物组合物，其特征在于，所述的佐剂包括氧化铝、皂苷、quilA、胞壁酰二肽、矿物油或植物油、基于囊泡的佐剂、非离子嵌段共聚物或DEAE葡聚糖、细胞因子。