[发明专利]一种马驽巴贝斯虫病荧光PCR检测试剂盒

权利要求书

1.一种用于检测马驽巴贝斯虫病(Babesiacaballi)的遗传标记物，其具有SEQIDNo.4所示的序列或其特异性片段。

2.用于扩增权利要求1所述遗传标记物的特异性引物对，其核苷酸序列为SEQIDNo.1和SEQIDNo.2所示：

上游引物：5’-CGCATTTGCAGTCAGGTCC-3’

下游引物：5’-ACTGGTAGGGCTCAGGAAGG-3’。

3.与权利要求2所述的引物配合使用的荧光探针，其核苷酸序列为SEQIDNo.3所示：

5’-AGGGGAGTAACTGCAGTGCTTCCGT-3’。

4.一种检测马驽巴贝斯虫病的试剂盒，其特征在于，含有权利要求2所述的特异性引物对和权利要求3所述的荧光探针。

5.如权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，还包括荧光定量PCR反应试剂，阳性对照品和阴性对照品，所述阳性对照品为马驽巴贝斯虫病的标准阳性模板，阴性对照品为灭菌去离子水。

6.如权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，采用荧光PCR方法进行检测，制定标准阳性模板，其25μL反应体系为：

7.根据权利要求4-6任一所述的试剂盒，其特征在于，试剂盒中的引物、探针荧光PCR工作程序为：95℃预变性5min，1个循环；95℃变性15s，60℃变性45s，40次循环。

8.如权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，其采用荧光定量PCR方法进行检测，优化后的荧光定量PCR反应体系为25μL：

9.根据权利要求2所述的特异性引物对和权利要求3所述的荧光探针在制备检测马驽巴贝斯虫病试剂盒中的应用。