[发明专利]一种大肠杆菌培养基

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种大肠杆菌培养基及其制备方法。

背景技术

大肠杆菌(学名：Escherichiacoli，通常简写为E.coli))是生活在温血动物 (包括鸟类和哺乳动物)大肠中的重要细菌种类，对食物正常消化具有重要作 用。大肠杆菌是肠杆菌科的一员，由于其结构简单，基因组已被测序，经常作 为细菌的模式生物广泛用于科学研究。尤其是利用生理生化和分子生物学等手 段对大肠杆菌生命机能的研究极大地推动了对其他生物生命机理的解析。此外， 在生物工程中，大肠杆菌被广泛用于基因复制和表达的宿主。

在水净化和污水处理领域，大肠杆菌很早就被选作水污染程度的指示性物 种。目前，大肠杆菌已被广泛用作食品卫生质量检验的指示菌。大肠菌群的食 品卫生学意义是作为食品被粪便污染的指示菌，食品中粪便含量只要达到 10-3mg/kg即可检出大肠杆菌。

培养基(Medium)是人工将多种营养物质按微生物生长代谢的需要配制成 的一种营养基质，是在室内人工培养微生物的物质基础。而微生物在培养基中 的生长是室内对微生物进行科学研究的先决条件，如固体培养基中的微生物可 用来分离、鉴定和保种，液体培养的微生物则可用来进行代谢产物的研究。尽 管由于微生物的种类和研究目的不同，在培养基组成成分的配制上各有差异， 但任何一种培养基的配制均需满足微生物生长发育所必需的水分、碳源、氮源、 无机盐、生长因子以及某些特需的微量元素等。此外，培养基配制时还需考虑 各营养成分之间的均衡和协调，以及适宜的酸碱度(pH值)、缓冲能力、氧化 还原电位和渗透压等。

目前，常用的大肠杆菌培养基有LB培养基、牛肉膏蛋白胨培养基、胆盐乳 糖培养基等。现有的培养基大都存在配制成本过高、投资大、不易大批量配制 的问题。尤其在室内培养试验中，经常会因国内药品纯度不够、杂质较多而从 国外购置药品，进一步增加了培养基配制成本。虽然这些培养基已被广泛应用， 但如果要进行对培养基需求量大的水体净化和污水处理等方面的室内模拟实 验，会受到成本高、投资大的限制，进而会带来实验重复率低和实验效果差等 问题。

鉴于上述缺陷，本设计人积极加以研究创新，以期创设一种大肠杆菌培养 基，使其更具有产业上的利用价值。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明的目的是提供一种大肠杆菌培养基，该培养 基是比LB培养基、牛肉膏蛋白胨培养基、胆盐乳糖培养基等更经济、实用、而 且等效，能实现培养基的大批量低成本配制。

在一方面，本发明提供一种大肠杆菌培养基，每升培养基中含有以下重量 的各组分：葡萄糖10-20g，硝酸钠10g，蛋白胨5-14g，磷酸二氢钾0.2-3g，磷 酸氢二钾0.5-5g，余量为水。

在一具体实施例中，每升培养基中含有以下重量的各组分：葡萄糖10g，硝 酸钠10g，蛋白胨5g，磷酸二氢钾0.2g，磷酸氢二钾0.8g，余量为水。

在另一具体实施例中，每升培养基含有以下重量的各组分：葡萄糖15g，硝 酸钠10g，蛋白胨10g，磷酸二氢钾1.5g，磷酸氢二钾3g，余量为水。

在又一具体实施例中，每升培养基含有以下重量的各组分：葡萄糖20g，硝 酸钠10g，蛋白胨14g，磷酸二氢钾3g，磷酸氢二钾5g，余量为水。

在另一方面，本发明还提供上述大肠杆菌培养基的制备方法，包括以下步 骤：

(1)将葡萄糖、硝酸钠、蛋白胨、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾加入到容器中， 加水并搅拌溶解，定容；

(2)调节pH值；

(3)分装培养基；

(4)灭菌。

进一步的，在步骤(1)中，水为无菌水。

进一步的，在步骤(2)中，将pH值调节至7.2-7.4。

进一步的，在步骤(3)中，培养基的分装量以不超过三角烧瓶的1/2为宜。

进一步的，在步骤(4)中，在0.025-0.1MPa压力下灭菌。

进一步的，在步骤(4)中，当葡萄糖浓度超过15g/L时，在105-115℃温 度下灭菌；当葡萄糖浓度低于15g/L时，在115-121℃的温度下灭菌。

进一步的，在步骤(4)中，灭菌时间为20-30分钟。

进一步的，在步骤(4)中，当温度为116-121℃时，灭菌20分钟，温度为 105-115℃时，灭菌30分钟。