[发明专利]一种脾多肽的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于动物蛋白质提取领域，具体涉及一种脾多肽的制备方法。

背景技术

人体很多活性物质都是以肽的形式存在，没有肽，就没有活性，就没有生命。肽在人体中，涉及人体的激素、神经、细胞生长；其可在人体作为运输工具，将人体的所食的各种营养物质与维生素、微量元素等输送至人体的细胞、器官、组织。因此，人们越来越关注肽。

多肽是α－氨基酸以肽键连接在一起而形成的化合物，它也是蛋白质水解的中间产物。通常由三个或三个以上氨基酸分子脱水缩合而成的化合物都可以成为叫多肽。

从人以外的动物脾脏（如猪和牛的脾脏）中提取的脾多肽，可用于原发性和继发性细胞免疫缺陷病（如湿疹、血小板减少、多次感染综合症等）、呼吸道及肺部感染、可在治疗放化疗引起的白细胞减少症、白血病、再生性障碍贫血、淋巴瘤及其他恶性肿瘤、改善肿瘤患者恶变质、改善术后或重症患者身体虚弱时辅助使用。

从人以外的动物脾脏（如猪和牛的脾脏）中提取的脾多肽的方法中，具有大量使用有机溶剂，生产成本高，生产安全和劳动安全要求高的缺点；且生产周期长。

发明内容

为解决以上技术问题，本发明的目的在于提供一种脾多肽的制备方法。本发明具有产率高，成本较低，生产周期短，产品质量好等特点。

为实现上述目的，本发明提供一种脾多肽的制备方法，该方法包括如下步骤：

（1）取出鲜牛或猪脾脏，或解冻的牛或猪脾脏，用纯净水洗净表面的污物、血水及杂质，摘取筋膜、血管；

（2）将清洗干净的牛或猪脾脏，按原料与纯净水比例为1:0.8-1.0混合后，用胶体磨研磨匀浆，初磨时调到最粗的细度，待组织基本破碎完后再调至较细的细度，研磨匀浆循环8-10min/批，然后添加为匀浆2倍的纯净水继续匀浆2-3min，把每批次匀浆好的脾脏浆液混合均匀，用NaOH溶液调PH值至9.0；

（3）将调PH值后的脾脏浆液放入浓度为0.1%-0.5%的乙酸溶液中，并加入胃蛋白酶；脾脏浆液和胃蛋白酶的放入比例为：每100-150毫克的0.1%-0.5%乙酸溶液中加入5-10克脾脏浆液和1-5克的胃蛋白酶；然后将它们充分混匀，使用磁力搅拌浸泡30-60小时，磁力搅拌温度为20-35℃，获得酶解液；

（4）将酶解液加热至90-95℃，保持10-15min灭酶，将已灭酶的酶解液排出，酶解液温度下降小于50℃时，在搅拌条件下，添加入质量浓度为15％乙酸溶液，调节PH值至4.8-5.0，沉析未酶解的脑蛋白、磷脂及其它大分子杂质；沉析物用200目滤布离心过滤，去除沉淀后，分离出下层清澈的液体，向清液加入原料牛或猪脾脏重量1.5-2%的活性炭脱色脱味，搅拌20-30min后过滤，得到滤液和滤质；

（5）将所述滤液采用真空冷冻干燥制得脾多肽粉，冻干工艺参数：物料厚度8-9mm，预冻温度-35--40℃，预冻时间2-2.5h，升华时加热板温度45-50℃，干燥仓工作压力22-26Pa，解析时加热板温度60-65℃。

作为优选，步骤（2）中的所述的最粗的细度为80目，所述的较细的细度为120目。

优选的，所述步骤（3）中所用的胃蛋白酶选用酶活力大于等于1200u/g的胃蛋白酶。

优选的，在所述步骤（4）的过滤采用10000-50000道尔顿膜超滤。

优选，所述步骤（4）中的活性炭为颗粒状活性炭，且粒径为20-40目。

有益效果

（1）通过调整和优化制备工艺，本发明获得的脾多肽产品纯度高，风味良好，无腥异味；生产周期短，大大降低了脾多肽制备的生产成本；反应条件温和，保持了脾多肽的生物活性。

（2）原料准备→清洗→打浆→酶解→加热→灭酶→静置→吸附→膜分离→真空冷冻干燥，得到的脾多肽的提取率为75%以上，脾多肽得率为13.2%以上。

（3）本发明的方法工艺简单，易控制，适于工厂化规模生产采用。

具体实施方式

实施例一

取出鲜牛脾脏，用纯净水洗净表面的污物、血水及杂质，摘取筋膜、血管；将清洗干净的牛脾脏，按原料与纯净水比例为1:0.8混合后，用胶体磨研磨匀浆，初磨时调到最粗的细度，待组织基本破碎完后再调至较细的细度，研磨匀浆循环8min/批，然后添加为匀浆2倍的纯净水继续匀浆2min，把每批次匀浆好的脾脏浆液混合均匀，用NaOH溶液调PH值至9.0。所述的最粗的细度为80目，所述的较细的细度为120目。