[发明专利]基于代谢物及基因表达筛选三七皂苷合成关键基因的方法

权利要求书

1.一种基于代谢物及基因表达筛选三七皂苷合成关键基因的方法，其特征在于包括如 下步骤：

(1)分析三七不同部位三萜皂苷类物质代谢轮廓；

(2)分析皂苷合成途径关键基因在三七不同部位的表达谱；

(3)构建基因表达和皂苷的代谢相关图，筛选出三七中皂苷合成关键基因。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述代谢轮廓采用高效液相色谱-质谱联 用系统进行，所述表达谱采用荧光定量PCR进行，所述相关图采用典型关联分析进行。

3.根据权利要求1所述的方法，所述不同部位包括：叶、叶柄及根。

4.根据权利要求1所述的方法，所述关键基因包括：法尼基焦磷酸合酶(FPS)、鲨烯合酶 (SQS)、鲨烯环氧酶(SE)、达玛烷二醇合成酶(DS)、细胞色素P450氧化酶(CYP716A53)。

5.根据权利要求2所述的方法，其特征还在于采用高效液相色谱-质谱联用系统对三七 样品的甲醇提取物进行分析。

6.根据权利要求2所述的方法，所述定量分析具体是分别提取样品RNA，再将RNA反转录 合成第一链cDNA，以cDNA为模板，进行实时荧光定量PCR。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤(3)中所述的基因表达量和皂苷代谢量 的相关关系网络图的构建，是通过典型关联分析将三七皂苷含量与皂苷合成途径关键基因 表达量相结合而分析得到的，具体是使用皮尔逊相关系数对皂苷含量及皂苷合成途径关键 基因表达量进行典型相关分析，变量相关系数高于0.5作为筛选关键合成基因的标准。