[发明专利]建立克服基因功能冗余的全基因组功能缺失筛选方法有效

专利信息
申请号: 201610091342.8 申请日: 2016-02-18
公开(公告)号: CN107090596B 公开(公告)日: 2020-08-28
发明(设计)人: 李林;毛丽;吴殿青;李亦学;王振 申请(专利权)人: 中国科学院分子细胞科学卓越创新中心
主分类号: C40B50/06 分类号: C40B50/06;C40B40/06
代理公司: 上海一平知识产权代理有限公司 31266 代理人: 刘妍珺;陆凤
地址: 200031 上海*** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 建立 克服 基因 功能 冗余 基因组 缺失 筛选 方法
【权利要求书】:

1.一种构建靶向基因家族的组合siRNA文库的方法,其特征在于,所述方法包括步骤:

(1)提供一蛋白组群;

(2)根据所述蛋白组群中的各蛋白序列信息,进行基于结构域的多序列比对,把具有相同结构域的蛋白归为一类,形成蛋白超家族;

(3)对所述蛋白超家族中蛋白种类>n的蛋白超家族进行拆分获得蛋白家族;对所述蛋白超家族中蛋白种类≤n的蛋白超家族不进行拆分,直接归类为蛋白家族;从而实现各蛋白家族中家族成员数均≤n;

(4)提供针对各蛋白家族中各成员的siRNA,将针对同一蛋白家族中各成员的siRNA组成siRNA集,针对不同蛋白家族的siRNA集构成了所述靶向基因家族的组合siRNA文库;

其中n为2、3、4、或5。

2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,n为2、或3。

3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述蛋白组群包括≥200种蛋白。

4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述蛋白组群包括≥500种蛋白。

5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述蛋白组群包括≥1000种蛋白。

6.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述蛋白组群包括≥2000种蛋白。

7.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述蛋白组群包括≥5000种蛋白。

8.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述蛋白组群包括同一物种的70%~100%的蛋白种类。

9.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(1)中,所述蛋白组群中的各蛋白均具有对应的天然或非天然siRNA。

10.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(2)中,对于包含多个结构域的蛋白,经基于结构域的多序列比对后,根据比对结果的统计显著性,留取统计显著性最小的结构域,把具有相同的所述统计显著性最小的结构域的蛋白归类到一起,形成所述蛋白超家族。

11.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(3)中,对所述蛋白超家族中蛋白种类>n的蛋白超家族进行拆分获得蛋白家族的具体步骤包括:

(a)对蛋白质超家族中的各个蛋白进行多重序列比对;

(b)根据步骤(a)的比对结果构建系统发育树;

(c)基于所述系统发育树反应出的序列远近关系,将系统树拆分为蛋白家族,每个蛋白家族的成员数≤n。

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