[发明专利]转基因牡丹愈伤组织的GUS基因组织化学染色方法有效
| 申请号: | 201610078469.6 | 申请日: | 2016-02-04 |
| 公开(公告)号: | CN105648032B | 公开(公告)日: | 2019-09-06 |
| 发明(设计)人: | 何松林;王政;贺丹;申萍;李永华;李晓娟 | 申请(专利权)人: | 河南农业大学;河南科技学院 |
| 主分类号: | C12Q1/34 | 分类号: | C12Q1/34 |
| 代理公司: | 郑州优盾知识产权代理有限公司 41125 | 代理人: | 张真真 |
| 地址: | 450002 河*** | 国省代码: | 河南;41 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 转基因 牡丹 组织 gus 基因 组织化学 染色 方法 | ||
1.一种转基因牡丹愈伤组织的GUS基因组织化学染色方法,其特征在于:
将转基因牡丹愈伤组织从培养基中取出,用蒸馏水洗去残留菌体,放入离心管中,加入Buffer A至没过愈伤组织,置于24℃环境中,侵泡1h,用移液枪将Buffer A吸出,加入Buffer B至没过愈伤组织,置于24℃黑暗环境中染色过夜或数小时,至愈伤组织出现蓝色;
Buffer A成分如下:
其中0.2M NaPO4buffer溶液由0.2M Na2HPO4和0.2M NaH2PO4混合配制而成,每100ml的0.2M NaPO4buffer溶液由62ml 0.2M Na2HPO4和38ml 0.2M NaH2PO4混合而成,Buffer A置于4℃保存;
Buffer B由Buffer A和X-gluc混合配制而成,X-gluc的浓度为1mg/ml,Buffer B置于-20℃,避光保存。
2.根据权利要求1所述的转基因牡丹愈伤组织的GUS基因组织化学染色方法,其特征在于:0.2M Na2HPO4配制方法:将7.16g Na2HPO4溶于水,定容至100ml;0.2M NaH2PO4的配制方法:将3.12g NaH2PO4溶于水,定容至100ml。
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