[发明专利]基于微流控技术的CTC蛋白质分型试剂盒

权利要求书

1.一种基于微流控技术的CTC蛋白质分型试剂盒，其特征在于，包括有：

(1)针对不同CTCs标志蛋白质的捕获抗体复合物：每种捕获抗体复合物由与对应的标志蛋白质特异性结合的捕获抗体和适配体通过可剪切材料连接而成，所述可剪切材料为具有2个或2个以上的限制性内切酶位点的回文结构的脱氧核糖核苷酸双链；所述适配体能与相应的特异性结合物结合；

(2)表面偶联有细胞捕获组件的微流控芯片，所述细胞捕获组件由微柱构成，所述微柱的一端与微流控芯片相连，另一端修饰有特异性结合物，所述特异性结合物能与上述相应的适配体特异性结合。

2.根据权利要求1所述的基于微流控技术的CTC蛋白质分型试剂盒，其特征在于，所述适配体选自：生物素、地高辛、荧光素或单链脱氧核糖核苷酸中的一种；所述特异性结合物为相应的链霉亲和素、抗地高辛抗体、抗荧光素抗体或互补单链脱氧核糖核苷酸中的一种。

3.根据权利要求1所述的基于微流控技术的CTC蛋白质分型试剂盒，其特征在于，针对每种CTCs标志蛋白质分别有相应的捕获抗体复合物：

所述CTCs标志蛋白质为选自EpCAM、E-cadherin、KTR18和KTR19中的至少一种作为上皮细胞类型标志蛋白质，和/或选自N-cadherin、vimentin、fibronectin、ZEB1和SNAI1中的至少一种作为间质细胞类型标志蛋白质；

所述捕获抗体复合物，针对每种CTCs标志蛋白质，其捕获抗体复合物分别由相应的CTCs标志蛋白质捕获抗体构成；不同的CTCs，其适配体、可剪切材料相同。

4.根据权利要求1所述的基于微流控技术的CTC蛋白质分型试剂盒，其特征在于，还包括有：针对每种CTCs标志蛋白质的标记抗体，所述标记抗体能与相应捕获抗体发生特异性结合反应，且修饰有荧光基团，不同CTCs细胞类型，其标记抗体荧光基团互不相同。

5.根据权利要求4所述的基于微流控技术的CTC蛋白质分型试剂盒，其特征在于，还包括：针对白细胞标志蛋白质的磁珠抗体，所述磁珠抗体为针对白细胞标志蛋白质的标记抗体与磁珠结合而成；所述磁珠抗体能与白细胞标志蛋白质发生特异性结合反应，所述针对白细胞标志蛋白质的标记抗体修饰有荧光基团，且与CTCs细胞类型荧光基团互不相同。

6.根据权利要求1至5任一项所述的基于微流控技术的CTC蛋白质分型试剂盒，其特征在于，所述脱氧核糖核苷酸双链的碱基序列分别如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示。

7.根据权利要求6所述的基于微流控技术的CTC蛋白质分型试剂盒，其特征在于，所述脱氧核糖核苷酸双链中的一条单链的5’端设有氨基，用于连接捕获抗体，适配体连接于该单链的3’端，或者适配体连接于另一条单链的5’端；

或所述脱氧核糖核苷酸双链中的一条单链的3’端设有氨基，用于连接捕获抗体，适配体连接于该单链的5’端，或适配体连接于另一条单链的3’端。

8.根据权利要求7所述的基于微流控技术的CTC蛋白质分型试剂盒，其特征在于，碱基序列如SEQ ID NO:1的脱氧核糖核苷酸链的5’设有氨基基团，脱氧核糖核苷酸链通过该氨基基团与捕获抗体相连；碱基序列如SEQ ID NO:2的脱氧核糖核苷酸链的5’连接有适配体。

9.根据权利要求1至5任一所述的基于微流控技术的CTC蛋白质分型试剂盒，其特征在于，所述适配体为生物素，所述特异性结合物为相应的链霉亲和素。

10.根据权利要求5所述的基于微流控技术的CTC蛋白质分型试剂盒，其特征在于，白细胞标志蛋白质为CD45。

11.根据权利要求3至5任一项所述的基于微流控技术的CTC蛋白质分型试剂盒，其特征在于，所述CTCs标志蛋白质为选自EpCAM、E-cadherin、KTR18和KTR19为上皮细胞标志蛋白质，和选自N-cadherin、vimentin、fibronectin、ZEB1和SNAI1作为间质细胞标志物蛋白质。