[发明专利]一种石蜡制片粘片剂配方及其制备方法有效
| 申请号: | 201610039893.X | 申请日: | 2016-01-21 |
| 公开(公告)号: | CN105466746B | 公开(公告)日: | 2018-05-29 |
| 发明(设计)人: | 孙会忠;宋月芹;王小东;侯小改 | 申请(专利权)人: | 河南科技大学 |
| 主分类号: | G01N1/28 | 分类号: | G01N1/28 |
| 代理公司: | 北京君恒知识产权代理事务所(普通合伙) 11466 | 代理人: | 林潮;张璐 |
| 地址: | 471003 河*** | 国省代码: | 河南;41 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 石蜡制片 粘片剂 配方 制备 蒸馏水 动植物材料 明胶 显微观察 制备过程 鸡蛋清 糯米粉 备选 乳液 | ||
本发明公开了一种石蜡制片粘片剂配方及其制备方法,该配方为每100mL含有以下组成成分:糯米粉乳液3~5mL、鸡蛋清1~3mL、明胶0.4~0.6g,余量为蒸馏水。本发明还公开了一种石蜡制片粘片剂配方的制备方法,本发明技术方案目的明确,效果可靠,制备过程通俗易懂,便于操作,可作为动植物材料石蜡制片显微观察时的备选粘片剂,适合推广应用。
技术领域
本发明属于制片技术领域,涉及一种石蜡制片粘片剂配方及其制备方法。
背景技术
制片技术是生物显微观察技术的一个重要组成部分,而石蜡制片技术又是生物制片技术中应用最为普遍的一种,它适合于绝大部分生物材料的光学显微镜观察,对硬件要求较低,实验成本也很低,是各层次研究人员比较钟爱的一种显微观察手段。粘片剂是石蜡制片技术中的一个重要环节,脱片现象是石蜡制片中极为常见的一种情况,很多时候因为脱片而导致整个制片过程失败,既浪费了大量试剂,也消耗了宝贵的时间;当实验材料比较稀有和珍贵时,因粘片剂不良而导致的制片失败,更会造成无法挽回的损失和遗憾。石蜡制片技术中最为常用的粘片剂主要有火棉胶粘片剂、明胶粘片剂和蛋白粘片剂,但他们存在的最突出的共性问题是脱片率较高,实验失败率也随之增高,尤其是对于技术不娴熟的操作者来说,脱片始终是一个颇令人烦恼的问题。所以,探索适用性更广、效果能够得到更好保障的粘片剂新配方及其制备方法,对丰富和完善生物制片技术具有积极的意义,实际推广应用前景广阔。
目前,各类文献记载的石蜡切片制片过程中用到的粘片剂有三种,即火棉胶粘片剂、明胶粘片剂和蛋白粘片剂,其配方如下:
火棉胶粘片剂:火棉胶1~2g溶解在纯酒精和乙醚各半的混合液中即成。
明胶粘片剂:溶液甲(明胶1g+100mL蒸馏水+石炭酸2g+甘油15mL),溶液乙(40%甲醛4mL+100mL蒸馏水),使用时先滴加溶液甲,再滴加溶液乙。
蛋白粘片剂:鸡蛋清25mL+甘油25mL+石炭酸0.5g。
以上三种传统的火棉胶粘片剂、明胶粘片剂和蛋白粘片剂在石蜡制片中都有应用,但存在的问题也较为突出,这些不足集中体现在:(1)三种粘片剂的脱片率均比较高,应用效果难以把握;(2)明胶粘片剂涉及试剂较多,而且使用步骤较为繁琐;(3)三种粘片剂均涉及毒性较强的化学试剂,如石炭酸、乙醚,对长时间操作制片人员存在潜在的人身危害;(4)三种粘片剂通用性比较欠缺,如火棉胶粘片剂更加适合大型材料和切片较厚的材料,对小型或要求切片较薄时使用效果较差;蛋白粘片剂更加适合动物材料等。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术中存在的缺陷,提供一种石蜡制片粘片剂配方及其制备方法,达到以下目的:
(1)提高石蜡制片过程中粘片剂的广谱性;(2)提高粘片剂使用效果,改善石蜡制片过程中传统粘片剂黏固不牢固、易于脱落的问题;(3)提高石蜡制片的成功率。
其具体技术方案为:
一种石蜡制片粘片剂配方,每100mL含有以下组成成分:糯米粉乳液3~5mL、鸡蛋清1~3mL、明胶0.4~0.6g,余量为蒸馏水。
优选地,每100mL含有以下组成成分:糯米粉乳液4mL、鸡蛋清2mL、明胶0.5g,余量为蒸馏水。
一种本发明所述的石蜡制片粘片剂配方的制备方法,包括以下步骤:
步骤1.糯米粉乳液的制备:称取糯米粉3g,于烘箱中130℃干热1h,放入10mL离心管中,加7mL蒸馏水,在涡旋振荡器震荡10min后,2000r/min离心2min,上清液即为糯米粉乳液;
步骤2.粘片剂混合液的制备过程:
①称取明胶0.4~0.6g,放入烧杯,加入蒸馏水70mL,置于36℃烘箱至明胶完全溶解,再冷却至室温,备用;
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