[发明专利]基于牦牛乳曲拉的酪蛋白降糖降脂肽及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了属于生物技术领域的一种基于牦牛乳曲拉的酪蛋白降糖降脂肽及其制备方法和应用。所述制备方法为：将牦牛乳曲拉经粉碎、浸泡后采用物理辅助溶解技术进行预处理，然后调节pH至4‑7，离心后过滤，得到牦牛乳曲拉酪蛋白溶液；对其用胃蛋白酶和胰蛋白酶依次水解后，离心取上清液进行超滤，得到牦牛乳曲拉的酪蛋白降糖降脂肽溶液；浓缩后利用类蛋白反应对其进行脱苦处理，干燥后获得牦牛乳曲拉的酪蛋白降糖降脂肽粉。所述制备方法采用的原材料价格便宜，且获得的降糖降脂肽营养价值高、无副作用、吸收效果好，对糖尿病和高脂血症能够起到良好的辅助降糖降脂作用，在制备食源性降糖降脂食品或保健品中具有良好的应用前景。

技术领域

本发明属于生物技术领域，特别涉及一种基于牦牛乳曲拉的酪蛋白降糖降脂肽及其制备方法和应用。

背景技术

近年来，随着人们生活水平的提高以及生活方式的改变，糖尿病、肥胖症、动脉硬化、脂肪肝等代谢性疾病的发病率逐年升高。据国际糖尿病联盟(International DiabetesFederation，IDF)统计，截至2014年，全球糖尿病人数已达到3.82亿，预计到2035年，全球将有5.92亿人受到糖尿病的困扰。目前，我国糖尿病患者人数已达0.96亿。机体长期处于高血糖状态会诱发脂肪代谢紊乱，导致血脂异常，增加心血管疾病的发病率。据世界卫生组织(World Health Organization，WHO)公布数据显示，2012年全球约有1750万人死于心血管疾病，占全球死亡总数的31％。2014发布的中国心血管病报告，我国心血管疾病患者人数为2.9亿，心血管疾病占居民各类疾病死因之首。目前治疗糖尿病和高血脂等代谢性疾病的药物均存在肝脏损伤、乳酸中毒及胃肠道不适等不良反应，因此迫切需要寻求开发天然、安全、高效的具有降糖降脂生物学活性的食源功能因子。

曲拉是我国独有的乳资源，它是牦牛乳经脱脂后自然发酵制得的粗制奶酪，其酪蛋白含量高达70％以上。牦牛乳酪蛋白含有的多种生物活性序列，利用蛋白酶水解技术能够释放出来，产生具有降血压、抗氧化、抑菌、降糖降脂等生物学活性的多肽。

牦牛乳酪蛋白的溶解需要在碱性pH体系下，在中性和弱酸性pH体系下溶解度很低。因此，为了充分溶解牦牛乳酪蛋白，实现蛋白酶对其高效水解，目前大多专利技术均加入大量碱液溶解酪蛋白，但是这种处理方式会导致酶解液中盐分含量过高，不仅影响产品的品质，而且高盐的摄入也会威胁人体的健康。也有利用纳滤技术对制备的牦牛乳酪蛋白降血压肽进行除盐，但此法操作繁琐且耗时、效率低，不利于工业化生产。

此外，酪蛋白水解后会产生一系列分子量在6000Da以下，且含有疏水性氨基酸的多肽，这类多肽带有不同程度的苦味，影响其在食品领域中的应用。因此，需要对酶解产物进行脱苦处理。用活性炭吸附法可对牦牛乳酪蛋白的胰蛋白酶水解液进行脱苦处理，但这种方法会损失蛋白多肽中的功能成分而降低其生物学活性；以β-环状糊精为载体也可解决牦牛乳酪蛋白肽中疏水性多肽的苦味问题，然而，β-环状糊精的加入，不仅对蛋白肽体系引入了外源性物质，而且还会使体系产生一定的焦糊异味。

发明内容

本发明的目的在于提供一种基于牦牛乳曲拉的酪蛋白降糖降脂肽及其制备方法和应用。

为了实现上述目的，本发明采取的技术方案如下：

一种基于牦牛乳曲拉的酪蛋白降糖降脂肽的制备方法，包括以下步骤：

(1)将牦牛乳曲拉原料粉碎至30-120目，按重量：体积比为1g:(10-30ml)加入30-50℃的水中，浸泡1-5h，获得牦牛乳曲拉水溶液；采用物理辅助溶解技术对牦牛乳曲拉水溶液预处理后，调节其pH至4-7，搅拌30-90min；然后离心脱脂、去除杂质，收集上清液后进行过滤，收集滤液，得到牦牛乳曲拉酪蛋白溶液；

(2)调节牦牛乳曲拉酪蛋白溶液的pH至2-4，加入胃蛋白酶，在25-65℃条件下进行酶解反应，反应时间为1-3h；