[发明专利]一种何首乌促进生根培养基及其配制方法

说明书

技术领域

本发明属于何首乌组织培养技术领域，特别涉及一种何首乌促进生根培养基，还 涉及一种何首乌促进生根培养基的配制方法。

背景技术

何首乌，是蓼科何首乌属多年生缠绕藤本植物，块根肥厚，长椭圆形，黑褐色，其块 根入药，可安神、养血、活络、消痈，是常见的中药材。

目前组织培养是何首乌人工快速繁殖的常用手段之一，然而现有的组织培养技术 中何首乌出根培养的发根率不高，影响何首乌的组培快繁效率，同时因不能发根而造成大 量何首乌芽苗褐化死亡，浪费生产资源。

发明内容

基于现有技术存在上述问题，本发明提供一种何首乌促进生根培养基，其以1/2 MS培养基为基础培养基，并添加有NAA（萘乙酸）、KT（激动素）、含铈可溶性化合物、琼脂粉和 白砂糖，其具有发根率高、节约生产资源的优点。

一种何首乌促进生根培养基，以1/2MS培养基为基础培养基，并添加有NAA（萘乙 酸）、KT（激动素）、含铈可溶性化合物、琼脂粉和白砂糖。

1/2MS培养基为常规MS培养基大量元素浓度减少一半而制成，MS培养基为高盐培 养基，采用1/2MS培养基可以降低无机盐的浓度，更有利于促进何首乌芽发根。

NAA（萘乙酸）的浓度为0.2-0.8mg/L，KT（激动素）的浓度为0.1-0.6mg/L，含铈可 溶性化合物的浓度为0.1-0.2mM，琼脂粉的浓度为8～11g/L，蔗糖的浓度为25～35g/L。

NAA（萘乙酸）的浓度为0.3-0.7mg/L，KT（激动素）的浓度为0.2-0.4mg/L，含铈可 溶性化合物的浓度为0.14-0.18mM，琼脂粉的浓度为9～10g/L，蔗糖的浓度为28～33g/L。

所述的何首乌叶片诱导培养基的pH值为6.3~6.6。

所述的何首乌叶片诱导培养基的pH值为6.4。

所述的含铈可溶性化合物是硝酸铈，还可以是氧化铈和氯化铈，稀土元素铈能促 调节细胞内酶的活性，促进细胞合成生物碱，调节细胞生长和分化，何首乌芽苗生根。

一种何首乌促进生根培养基的配制方法，其包括以下步骤：

步骤S10溶解配制培养基：用蒸馏水溶解1/2MS基础培养基各成分，并添加NAA（萘乙 酸）、KT（激动素）、含铈可溶性化合物、琼脂粉和白砂糖；

步骤S20高温灭菌：将步骤S10配制好的培养基放于高压灭菌锅中，于120~121℃高温灭 菌20~21分钟，冷却凝固。

步骤S10还包括步骤S11调节pH值：使用HCL和KOH滴定调节培养基pH值至6.4。

具体实施方式

实施例一：配制何首乌促进生根培养基。

根据表1所示的1/2MS培养基配方以及表2所示的何首乌促进生根培养基配方，配 制本发明所述的何首乌促进生根培养基。

用天平称取1/2MS培养基中的各成分以及NAA（萘乙酸）、KT（激动素）、含铈可溶性 化合物、琼脂粉和白砂糖，置于三角瓶中，加入适量蒸馏水，搅拌溶解，并调节pH值至6.4，定 容至1000mL。将三角瓶封口，置于高压灭菌锅中，于121℃灭菌20min，然后置于超净工作台 中自然冷却，备用。

将冷却到50-60℃时将培养基分装至组织培养瓶中，晾凉，待其凝固后将组织培养 瓶封口，备用。

表11/2MS培养基的成分及其用量。

表2何首乌促进生根培养基的成分及其用量。

实施例二：本发明所述的何首乌促进生根培养基的测试

根据表1所示的1/2MS培养基配方以及表3所示的何首乌促进生根培养基配方，参照实 施例一所述的培养基制备方法，分别配制各试验组、对照组的何首乌促进生根培养基。

表3何首乌促进生根培养基。

在超净工作台中选取生长正常、无褐化的何首乌丛生芽，将丛生芽取出，用无菌手 术刀将丛生芽分割成单芽，并将生长良好、无褐化、强壮的单芽接种于表3所示各试验组、对 照组的培养基中，然后于光暗周期为12h光照/12h黑暗、光照强度为2000lux、温度为25±2 ℃的条件下进行培养。培养20天后统计何首乌芽发根率和平均单株发根数。

表4何首乌促进生根养基测试结果。

由表4所示的结果得知，稀土元素铈对何首乌生根起这巨大的促进作用，可以将发 根率提高到90%以上，同时单株发根数也提高到5条以上，可以大大提高何首乌移栽成活率。 另外从试验组2、6、7与其他实验组的结果得知，稀土元素铈的使用量对何首乌生根促进作 用有影响，使用浓度太高不会取得更好的促进效果，反而会起抑制作用。