[发明专利]检测镰状细胞病的方法以及实施该方法的试剂盒

权利要求书

1.一种测试个体中镰状细胞病的方法，其特征在于，该方法包括以下连续的步骤，步骤a/和b/可连续或同时进行：

a/使来自所述个体的一个血样（44）与一种诱导镰状红细胞镰变的试剂接触，所述试剂能够将包含在所述血样中的红细胞置于缺氧条件下；

b/使用一个多孔膜（24）过滤含有红细胞的所述血样（44），其中该多孔膜（24）的孔径利用以下方式确定：该多孔膜（24）能够阻挡已经镰变的红细胞（47）穿过，并允许未经镰变的红细胞穿过；以及

c/在所述过滤步骤期间和/或所述过滤步骤结束时，检测所述多孔膜（24）上可能存在的残余物（47），所述残余物的存在与所述个体具有镰状细胞病特征的事实相关。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述诱导镰变的试剂为偏亚硫酸氢盐。

3.如权利要求1和2中任一项所述的方法，其中所述多孔膜（24）的孔径在2μm到8μm之间，优选在3μm到6μm之间或在6μm到7μm之间。

4.如权利要求1至3中任一项所述的方法，其中使所述血样（44）与所述诱导镰变的试剂接触通过将所述血样与pH值在6.8到7.4之间的缓冲液混合来进行，所述缓冲液含有所述诱导镰变的试剂并且不含细胞裂解剂。

5.如权利要求4所述的方法，其中所述缓冲液含有相对于所述缓冲液的体积以重量计在1％到10％之间，优选在2％到5％之间的所述诱导镰变的试剂。

6.如权利要求1至5中任一项所述的方法，其中使所述血样（44）与所述诱导镰变的试剂的接触时间大于或等于30秒，优选大于或等于1分钟，并且优先为介于2分钟到3分钟之间。

7.如权利要求1至3中任一项所述的方法，其中使所述血样（44）与所述诱导镰变的试剂接触在所述过滤步骤b/之前，通过将所述血样（44）沉积于经诱导镰变的试剂浸渍的多孔过滤器（41）上来进行，其中该多孔过滤器（41）的孔径利用以下方式确定：多孔过滤器（41）能够允许未经镰变的红细胞和已经镰变的红细胞（47）穿过，所述过滤器（41）置于所述多孔膜（24）上。

8.如权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述血样（44）的体积在10μl到50μl之间。

9.如权利要求1至8中任一项所述的方法，其中检测所述多孔膜（24）上可能存在的残余物（47）通过检测所述多孔膜（24）上可能的红色来进行。

10.如权利要求1至8中任一项所述的方法，其中所述多孔膜（24）置于由吸收性材料制成的一个构件（42）上，并且检测所述多孔膜（24）上可能存在的残余物（47）通过检测由吸收性材料制成的所述构件（42）上可能的颜色变化来进行，不存在颜色变化代表所述多孔膜（24）上存在残余物（47）。

11.一种用于实施如权利要求1至10中任一项所述的方法的试剂盒，其特征在于，包括一种诱导镰状红细胞镰变的试剂，该试剂能够将血样中含有的红细胞置于缺氧条件下；以及一个多孔膜（24），该多孔膜（24）的孔径利用以下方式确定：该多孔膜（24）能够阻挡已经镰变的红细胞（47）穿过，并允许未经镰变的红细胞穿过，所述试剂盒不含细胞裂解剂。

12.如权利要求11所述的试剂盒，其包括由吸收性材料制成的一个构件（42）。

13.如权利要求11和12中任一项所述的试剂盒，其中所述诱导镰状红细胞镰变的试剂包含在pH在6.8至7.4之间、不含细胞裂解剂的一种缓冲液中。

14.如权利要求11和12中任一项所述的试剂盒，包括一个多孔过滤器（41），其孔径被确定为能够允许未经镰变的红细胞和已经镰变的红细胞（47）穿过，并且该多孔过滤器（41）经所述诱导镰变的试剂浸渍。

15.如权利要求11至14中任一项所述的试剂盒，包括一个过滤模块（20）。

16.一种用于实施如权利要求1至10中任一项所述的方法的设备，其特征在于，包括：

- 用于使来自所述个体的所述血样（44）与所述诱导镰状红细胞镰变的试剂接触的自动化装置，

- 自动化过滤装置，用于在与所述诱导镰状红细胞镰变的试剂接触的步骤之后，使含有红细胞的所述血样（44）直接过滤通过所述多孔膜（24），以及

- 用于光学检测所述多孔膜（24）上可能存在的残余物（47）的装置。