[发明专利]稳定化的流感血凝素茎区三聚体及其用途

权利要求书

1.包含流感血凝素(HA)蛋白和接头肽的蛋白质构建体，其中所述HA蛋白缺乏头部区氨基酸序列的至少95％并且所述接头肽替换缺少的序列，其中所述接头肽的长度小于10个氨基酸；且

其中所述HA蛋白包含：

a.与SEQ ID NO:8的氨基酸N403-W435对应的氨基酸区域的缺失；和

b.氨基酸残基对中的取代，其中所述氨基酸残基对在折叠的HA蛋白中相互作用并且对应于SEQ ID NO:149的K1和E53；且其中折叠的改变的蛋白质中的氨基酸对之间的相互作用的强度大于折叠的野生型蛋白质中的氨基酸对之间的相互作用强度；且

其中所述蛋白质构建体由SEQ ID NO:80,83,86,89,92,95,98,101,104,158,164,170,176,182,188,197,203,209,214,217,222,224,226,228,230,232,235,240,242,244,246,248,250,252,254,256,258,261,268,275,282,289,296,303,310,317,324,331,338,345,352,359,366,373,380,394或400中任一项所示的氨基酸序列组成。

2.权利要求1的蛋白质构建体，其由以SEQ ID NO:92所示的氨基酸序列组成。

3.核酸，其选自下组：

a)核酸分子，其编码权利要求1或2的蛋白质；和

b)与(a)的核酸分子完全互补的核酸分子。

4.权利要求1或权利要求2的蛋白质构建体，其中所述HA蛋白与自装配的单体亚基蛋白连接以形成融合蛋白，其中所述融合蛋白自装配成纳米颗粒，使得在所述纳米颗粒的表面上展示所述融合蛋白的HA部分。

5.权利要求4的蛋白质构建体，其中所述自装配单体亚基是铁蛋白或2,4-二氧四氢蝶啶合酶。

6.权利要求5的蛋白质构建体，其中所述自装配单体亚基是铁蛋白，并且包含以SEQ IDNO:5所示的氨基酸序列。

7.权利要求4的蛋白质构建体，其中所述融合蛋白包含以SEQ ID NO:107、110、113、116、119、122、125、128、131、161、167、173、179、185、191、200、206、212、215、220、223、225、227、229、231、233、238、241、243、245、247、249、251、253、255、257、259、264、271、278、285、292、299、306、313、320、327、334、341、348、355、362、369、376、383、390或397中任一项所示的氨基酸序列。

8.核酸分子，其选自下组：

a)核酸分子，其编码权利要求4-7中任一项的融合蛋白；和

b)核酸分子，其与a)的核酸分子完全互补。

9.纳米颗粒，其包含权利要求4-7中任一项的融合蛋白。

10.疫苗，其包含权利要求9的纳米颗粒。

11.试剂盒，其包含权利要求9的纳米颗粒。

12.权利要求9的纳米颗粒，其中所述纳米颗粒引发针对流感病毒血凝素蛋白的茎区的免疫应答。

13.权利要求9的纳米颗粒，其中所述纳米颗粒引发针对流感毒株的免疫应答，所述流感毒株对于获得所述HA蛋白的流感病毒株是异源的。

14.权利要求9的纳米颗粒，其中所述纳米颗粒引发对流感毒株的免疫应答，所述流感毒株与获得所述HA蛋白的流感病毒是抗原趋异的。