[发明专利]联合应用HNF1α、HNF4α、FOXA3诱导分化治疗肝细胞癌

说明书

本发明涉及联合应用HNF1α、HNF4α、FOXA3诱导分化治疗肝细胞癌。具体地，本发明涉及利用肝细胞核因子HNF1α、HNF4α、FOXA3诱导人恶性肝细胞癌发生分化，从而应用于恶性实体肿瘤治疗的方法和用途。本发明的研究表明，通过向肝细胞癌细胞外源导入HNF1α、HNF4α、FOXA3基因，可有效地诱导肝癌细胞分化，从而提供了一种肿瘤诱导分化治疗的新方法。

技术领域

本发明涉及分子生物学、细胞生物学以及医学领域。涉及利用肝细胞核因子HNF1α、HNF4α、FOXA3诱导人肝细胞癌分化，从而应用于肝细胞癌治疗的方法和用途。

背景技术

肝癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一，约有一半患者分布在中国。尽管近年来肝癌的诊疗技术不断进步，其早期诊断困难、复发转移率高、放化疗不敏感的现状没有根本改观。唯一被批准用于肝癌的靶向治疗药物索拉非尼，治疗效果非常不理想。因此，肝癌的治疗研究亟需调整思路，寻找更加有效的治疗手段。

分化治疗是近些年兴起的一种治疗方法，通过诱导低分化的肿瘤细胞向成熟表型分化，抑制其增殖和转移，促进其凋亡，从而达到治疗肿瘤的目的。迄今分化治疗应用最好的是利用全反式维甲酸治疗急性早幼粒白血病，大量的病人获得了很好的治疗效果。血液肿瘤分化治疗的成功，也带动了实体肿瘤的分化治疗研究。相继出现了应用全反式维甲酸、二甲基亚砜和砷剂治疗乳腺癌、肺癌、结肠癌的研究，但肝癌的分化治疗研究目前还很少。

肝细胞核因子(Hepatocyte nuclear factor,HNF)是一类在肝细胞中相对特异性高表达的转录因子，在肝脏的发育和肝细胞功能维持方面发挥重要作用，家族成员包括包括HNF1、HNF3、HNF4、HNF6以及CCAAT/增强子结合蛋白(C/EBP)等，它们是一系列在肝脏中优势表达的转录因子(Schrem H,Liver-enriched transcription factors in liverfunction and development.Part I:the hepatocyte nuclear factor network andliver-specific gene expression，Pharmacological Reviews,2002Mar；54(1):129-58)。前期本发明人所在研究团队已经报道了HNF4α和HNF1α在肝癌分化治疗方面的应用前景(Yin C,Differentiation therapy of hepatocellular carcinoma in mice withrecombinant adenovirus carrying hepatocyte nuclear factor-4alpha gene，Hepatology,2008 Nov；48(5):1528-39)(Zeng X,Recombinant adenovirus carrying thehepatocyte nuclear factor-1alpha gene inhibits hepatocellular carcinomaxenograft growth in mice,Hepatology,2011Dec；54(6):2036-47)。但是肝癌异质性很强，在相当一部分肝癌组织中HNF4α或HNF1α的表达并不低，这也提示了单独应用HNF4α治疗肝癌具有很大的局限性。另外，理论上讲将多种肝细胞核因子联合导入肝癌细胞协同发挥作用，诱导肝癌细胞分化的效果可能更好。前期已有学者从肝细胞特异性的转录因子中，筛选能诱导人成纤维细胞向肝细胞转分化的转录因子，最终筛到了HNF1α、HNF4α和HNF3γ(FOXA3)。将这三种因子转入人成纤维细胞后,可获得人诱导型肝细胞(hiHeps,humaninduced hepatocytes)，其形态类似正常肝细胞，且具有肝细胞的标志物和生物学功能(Huang P,Direct reprogramming of human fibroblasts to functional andexpandable hepatocytes,Cell Stem Cell,2014Mar 6；14(3):370-84)。hiHeps的成功提示：既然这三种因子将成纤维细胞诱导成肝细胞，那它也很可能将肝癌细胞诱导为“带突变的正常功能肝细胞”(DNA突变仍然存在，但肝细胞功能已经恢复)。