[发明专利]周氏啮小蜂热激蛋白Hsp83的cDNA全长序列及应用

说明书

本发明得到：国家自然科学基金（31201730）；天津市高等学校科技发展计划项目（20110602）；天津师范大学博士基金（52XB1003）及天津市动植物抗性重点实验室开放基金的资助。

技术领域

本发明属于分子生物技术领域，研究周氏啮小蜂热激蛋白Hsp83的cDNA全长序列和不同温度下Hsp83表达的变化。

背景技术

热激蛋白Heatshockprotein(Hsp)是一类在生物体内广泛存在的，对体内外环境变化极为敏感的高保守性蛋白质，广泛参与了各种生理代谢途径，近年来已成为生物研究领域中的一个热点。根据其分子量的大小可将其分为不同的蛋白家族，其中Hsp83与温度胁迫应激性密切相关。温度是影响生物体生存至关重要的环境因子，只有在一定的温度范围内生物体才能进行物质能量代谢以维持正常生理活动，超出温度的耐受范围都会使生物的生长发育停滞甚至死亡。一般来说生物体受到高温或低温刺激后，蛋白合成量会有显著变化，用以增强抗逆境能力。由于热激蛋白会在胁迫消除后一段时间内保持一定的含量使生物体更好生存，可以认为其存在对于生物体适应环境有着重要作用。

周氏啮小蜂ChouioiacuneaYang是我国重要入侵物种美国白蛾Hyphantriacunea（Drury）的重要寄生性天敌，体长1.1-1.5mm，群集内寄生于美国白蛾蛹中，是抑制美国白蛾的主要天敌因子，对控制美国白蛾的危害起到重要作用。除寄生于美国白蛾外，还可寄生于鳞翅目的枯叶蛾科、毒蛾科、舟蛾科、尺蛾科、菜蛾科和双翅目的蝇科、寄蝇科及鞘翅目的叶甲科和瓢甲科等。

通过野外释放C.cunea可以达到有效防治美国白蛾的目的。然而，在野外环境下，C.cunea的活力会受到多重因素的影响，其中，温度作为一个主要生态因素，会影响C.cunea的生命力。在合适的温度范围投放小蜂，才会起到更好的防治效果。本发明通过转录组测序，报道了一个周氏啮小蜂热激蛋白Hsp83的cDNA全长序列，该序列可为深入研究周氏啮小蜂的温度耐受性机制奠定基础。通过实时荧光定量PCR方法，研究不同温度下白蛾周氏啮小蜂Hsp83基因表达的变化，研究结果可为科学利用天敌昆虫周氏啮小蜂提供理论基础。

发明内容

本发明的目的是报道一个周氏啮小蜂热激蛋白基因Hsp83基因的cDNA全序列及其对于温度协迫的影响。

本发明采用的技术方案是通过转录组测序获得周氏啮小蜂热激蛋白基因Hsp83基因的全序列，在通过RT-qPCR的方法研究不同温度下Hsp83基因表达的变化。

为此本发明公开了如下的技术内容：

周氏啮小蜂热激蛋白Hsp83的核苷酸序列，该序列全长2151bp，含完整的开放阅读框，具有SEQIDNO.1所示的核苷酸序列。对应的氨基酸序列如SEQIDNO.2所示；该序列编码716个氨基酸，分子量为81.9KDa，等电点为5.06。

本发明进一步公开了周氏啮小蜂热激蛋白Hsp83的核苷酸序列在用于检测防治美国白蛾病方面的应用。所述防治美国白蛾指的是：Hsp83基因表达受温度调控，通过检测Hsp83基因的表达情况，可以得知周氏啮小蜂对于温度胁迫的耐受情况，在低于周氏啮小蜂承受极限温度下释放小蜂，可以更好的起到防治美国白蛾的目的。通过实时荧光定量PCR方法，研究不同温度下白蛾周氏啮小蜂Hsp83基因表达的变化，研究结果可为科学利用天敌昆虫周氏啮小蜂提供理论基础。

周氏啮小蜂热激蛋白Hsp83基因，其cDNA序列和编码氨基酸的序列如表1、表2所示。

表1

表2

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DSGKELYIKIIPNKNDGTLTLIDTGIGMTKADLVNNLGTIAKSGTKAFMEALQAGADISM

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