[发明专利]一种毛钩藤的指纹图谱检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种毛钩藤的指纹图谱检测方法，属于药物技术领域。

技术背景

药用钩藤为茜草科钩藤属常绿藤本植物，攀援状灌木，以带钩的茎枝入药，它具有清热平肝、息风定惊功效，现代药理实验还证明钩藤有降压作用，因此具有很高的药用价值。2010版中国药典共收载有5个种，分别为：钩藤Uncarniarhynchopylla(Miq.)Miq.exHavil.、大叶钩藤UncarniamacrophyllaWail、毛钩藤UncarniahirsuteHavil.、华钩藤Uncarniasinensis(Oliv.)Havil和无柄果钩藤UncarniasessilifructusRoxb。虽然都被用于临床，然而由于种的不同，其中的化学成分组成就存在一定差异。药用钩藤在我国多地均有生长，主要分布于贵州的有毛钩藤、钩藤和华钩藤三个种。

现有技术中，文献“钩藤饮片HPLC指纹图谱研究”(谭超元等，中国实验方剂学杂志第18卷第1期，2012年1月)一文中公开了以流动相乙腈(A)-0.385％乙酸铵-冰乙酸水溶液(B)梯度洗脱(0～10min，15％～27％A；10min～40min，27％～35％A)、检测波长245nm的方法建立钩藤饮片的HPLC指纹图谱；文献“黔产钩藤HPLC指纹图谱的研究”(王克英等，中国医药指南第10卷第35期，2012年12月)一文中公开以流动相甲醇(A)-0.05％氨水(B)梯度洗脱(0～45min，70％～45％B；45min～75min，45％～35％B；75min～90min，35％～30％B)、流速1.0mL/min、检测波长245nm的方法建立钩藤的HPLC指纹图谱；文献“钩藤生物碱HPLC指纹图谱构建及不同基原种钩藤药材的鉴别”(黄样增等，中药材2014年02期，2012年12月)一文中公开以流动相乙腈(A)-甲醇(B)-水(10mmol/L三乙胺用磷酸调pH7.5)(C)梯度洗脱(0～15min，5-35％A，45％～5％B；15min～25min，35-30％A，5％～25％B；25min～45min，30-30％A，25％～45％B；45min～52min，30-0％A，45％～95％B)、流速1.0mL/min、检测波长245nm的方法建立钩藤的HPLC指纹图谱；文献“钩藤的HPLC指纹图谱研究”(黄艳萍等，中药新药与临床药理第21卷第4期，2010年7月)一文中公开了以流动相甲醇(A)-10mmol磷酸二氢铵溶液(B)梯度洗脱(0～5min，80％B；5min～50min，80％～40％B；50min～65min，40％～90％B)、流速1.0mL/min、检测波长254nm的方法建立不同产地钩藤的HPLC指纹图谱；这些检测方法虽然在一定程度上提高了钩藤的质量控制标准，但有的存在洗脱程序复杂、操作时间长等缺点，另外对不同种的药用钩藤还需要区别对待，且不同时期采收的毛钩藤药材，其分析评价还有待研究；为了更好的控制毛钩藤药材及其产品的质量，保证用药的安全性，更好的指导生产，使其从药材采收、加工等各个环节的控制更加严格合理，使消费者能全面认识产品质地，需要不断研究和摸索出更有利于药材及其产品鉴别和质量检测的方法。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种毛钩藤的指纹图谱检测方法。这种方法针对如下药材及产品向相关的生产、检测机构提供检测的指标、检测的手段、技术方法等，以便更好的控制该药材和产品的质量，保证用药的安全性，能够更好的指导药材的采收、加工、生产，使消费者能全面认识药材及产品质地，所针对的药材和产品为：

毛钩藤药材，由毛钩藤药材单独制备而成的制剂产品，包括药品、保健品；制剂剂型包括口服制剂、注射制剂、外用制剂、经皮吸收制剂等。

本发明是这样构成的：

毛钩藤的指纹图谱检测方法，包括以下内容：

(1)供试品溶液的制备：取待测毛钩藤样品，加氨水浸泡，再加入三氯甲烷，甲醇，超声提取，取出，放冷，过滤，滤液置于水浴上挥干，残渣用甲醇溶解，摇匀，微孔滤膜过滤，取续滤液作为供试品溶液；

(2)色谱条件：色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料：流动相A为乙腈，流动相B为0.1％～0.5％氨水溶液，梯度洗脱，流速为0.8～1.2ml/min、检测波长为254～260nm、柱温为20-30℃，记录时间为50-80min；