[发明专利]一种产纤维素木醋杆菌菌体浓度的在线评价方法

权利要求书

1.一种产纤维素木醋杆菌菌体浓度的在线评价方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)菌株活化：取冻干保存的木醋杆菌涂布到平板固体培养基上，28-32℃培养4-8天生成单菌落，挑选上述培养好的单菌落，用接种环均匀涂在斜面固体培养基上，于28-32℃的恒温培养箱中培养2-4天；

(2)摇瓶培养：用无菌小铲取一小块上述培养好的斜面薄膜，接入摇瓶液体培养基中，28-32℃培养4-6h；

(3)种子罐培养：将环管式多孔气体分布器置于种子罐中，并将在线电容检测装置的两根工作电极从种子罐侧向插入，然后装入液体培养基，经高温蒸汽灭菌后，将步骤(2)培养好的摇瓶种子液全部接入种子罐开始培养，培养温度28-32℃，培养压力为20-50Kpa，空气流量为3-10L/min；

(4)检测：在步骤(3)种子罐中进行培养的同时，开启在线电容检测装置，并将检测频率设置为300～2000Hz，实时在线监测的电容率的变化；

(5)终点：根据电容率变化与菌体浓度相关联的关系模型，绘制菌体浓度趋势图确定发酵培养的终点。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述的固体培养基组成为：葡萄糖2％-3％，多聚蛋白胨0.5％-1％，柠檬酸0.1％-0.2％，七水硫酸镁0.03％-0.05％，硫酸铵0.5％-1％，磷酸二氢钾0.3％-0.5％，乙酸钠0.1％-0.2％，琼脂粉2％-2.5％。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)和步骤(3)所述的液体培养基组成为：果糖1％-4％，玉米浆0.5％-2％，柠檬酸0.2％-0.5％，十二水磷酸氢二纳0.2％-0.5％，七水硫酸镁0.03％-0.05％，磷酸氢二铵0.4％-1％。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)和步骤(3)所述的液体培养基组成为：葡萄糖2％-3％，酵母粉0.5％-1％，柠檬酸0.115％-0.2％，十二水磷酸氢二纳0.34％-0.5％，大豆蛋白胨0.5％-1％，磷酸氢二铵0.1％-0.2％。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)和步骤(3)所述的液体培养基组成为：葡萄糖2-3％，玉米浆干粉0.5％-1.5，柠檬酸0.1％-0.3％，十二水磷酸氢二纳0.1％-0.3％，七水硫酸镁0.02％-0.04％，磷酸氢二铵0.2％-0.6％。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)所述的种子罐的体积为15L-100L。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)所述的装入液体培养基的体积为种子罐体积的60％-70％。

8.根据权利要求1至7任意一项所述的方法，其特征在于，步骤(3)和步骤(4)所述在线电容检测装置包含工作电极、传感器、转换器、频率控制元件及显示器。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述的工作电极为铂电极探头。