[发明专利]一种烟用纸张中4‑氨基偶氮苯残留量的测定方法

权利要求书

1.一种烟用纸张中4-氨基偶氮苯残留量的测定方法，其特征在于：将烟用纸剪碎后经还原分解，然后进行液液萃取和固相分散萃取，萃取液离心后直接以液相色谱-串联质谱测定纸张中的4-氨基偶氮苯，具体包括以下步骤：

a、将烟用纸试样按照相关规定进行裁剪；

b、样品的提取：将样品剪成5mm*5mm左右的碎片，混合均匀；称取1.0g样品；将碎片置于25mL具塞离心管中，加入9mL预热至70±2℃的10%的氢氧化钠溶液，猛烈摇动，使液体浸透样品，于70±2℃水浴中放置30min；加入连二亚硫酸钠水溶液1mL，保持70±2℃，反应30min；然后将离心管置于冰浴中，并不断振荡，迅速冷却至室温；

c、样品净化：往离心管中分别加入100μL内标工作溶液、10mL叔丁基甲醚和5g的无水硫酸钠，以2000r/min涡旋振荡5min，然后以8000r/min离心3min，把上层清液全部转移至25mL的储液管中，继续往离心管中加入10mL叔丁基甲醚，涡旋振荡5min，离心3min，取出上清液，并与第一次上清液合并，取10mL的合并后的上层清液，于15mL的离心管中，加入150mg无水硫酸钠和50mgC18固相吸附剂，于漩涡混合振荡仪上振荡2min，以6000r/min离心2min，取上清液2mL，氮吹近干，用1mL甲醇复溶，进LC-MS/MS分析；

d、准备标准工作溶液：称取0.01g标准品4-氨基偶氮苯到10mL容量瓶中，用甲醇稀释并最终配制成具有浓度梯度的标准工作溶液；

e、液相色谱-串联质谱测定:吸取配制好的不同浓度的标准工作溶液，注入液相色谱-串联质谱仪；色谱柱：规格150mm*2.1mm，3.5μm的ZORBAXC18柱；流动相：甲醇/水溶液，流速：300μL/min；梯度洗脱；柱温：30℃；进样量：5μL；采用的质谱条件：扫描方式：正离子扫描；电喷雾离子源(ESI);雾化气流量为55psi;气帘气流量18psi；辅助加热气流量为60psi；离子化温度500℃；碰撞气流量为12psi；4种气体均为氮气；停留时间为100msec；电离电压5500V,检测方式：正离子多离子反应监测（MRM）；

f、4-氨基偶氮苯残留量测定结果的计算

以内标法进行残留量的定量分析，即以目标物和内标的定量离子对峰面积对其相应浓度进行回归分析，得到标准曲线，相关系数大于等于0.999，对提取后的样品进行测定，测得检出分析物和内标的定量离子对峰面积比，代入标准曲线，求得样品中4-氨基偶氮苯的残留量。

2.根据权利要求1所述的烟用纸张中4-氨基偶氮苯残留量的测定方法，其特征在于：所述烟用纸为烟用内衬纸、接装纸、条盒包装纸。

3.根据权利要求1所述的烟用纸张中4-氨基偶氮苯残留量的测定方法，其特征在于：步骤a中的相关规定指的是：烟用接装纸的裁剪方式按照YC171-2008的规定进行，即准确裁切长200mm，宽40mm的接装纸样品，应包含一个单边；烟用内衬纸的裁剪方式按照YC264-2008的规定进行，即裁剪面积约170cm²，即相当于普通卷烟软盒包装所采用的内衬纸面积；卷烟条与盒包装纸的裁剪方式按照YC/T207-2006的规定进行，即对硬盒包装纸，参照印刷压痕准确裁取主包装面，面积为22.0cm*5.5cm，对软盒包装纸，取一张软盒包装纸，面积为15.5cm*10.0cm，对条包装纸，在包装正面中央区域，准确裁取22.0cm*5.5cm的样品。

4.根据权利要求1所述的烟用纸张中4-氨基偶氮苯残留量的测定方法，其特征在于：所述内标为D9-4-氨基联苯，内标工作溶液的配制方法如下：称取0.01gD9-4-氨基联苯标准品到10mL容量瓶中，用甲醇稀释得到浓度为1.0μg/mL的内标工作溶液。

5.根据权利要求1所述的烟用纸张中4-氨基偶氮苯残留量的测定方法，其特征在于：标准工作溶液的配制方法如下：称取10mg标准品4-氨基偶氮苯到10mL容量瓶中，精确至0.0001g，用甲醇定容，配制成浓度为1.0mg/mL的标准储备液；移取标准储备液100μL于100mL容量瓶中，用甲醇稀释定容，得到浓度约为1.0μg/mL的工作溶液；分别移取一定体积的工作溶液于10mL容量瓶中，并加入100μL内标工作溶液，用甲醇稀释定容，即配制成不同浓度的标准工作溶液，系列标准工作溶液浓度分别为：2ng/mL，5ng/mL，10ng/mL，20ng/mL，50ng/mL和100ng/mL。

6.根据权利要求1所述的烟用纸张中4-氨基偶氮苯残留量的测定方法，其特征在于：梯度洗脱程序如下表：

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