[发明专利]测定影响根际土壤氨基酸有效性因素的方法

权利要求书

1.一种测定影响根际土壤氨基酸有效性因素的方法，其特征在于，通过以下步骤实现：

（1）土壤样品采集：采集地带性土壤15个，取0-15cm的表层土壤5kg，同时准确记录取样点位置及种植制度和植被类型；

（2）样品前处理：样品挑出石块及根系后，过4mm筛后放置于通风干燥处风干，之后研磨过2mm筛，装袋备用；

（3）植物种植：称取47g风干土壤样品，放置于50ml离心管中，轻微震荡离心管，避免出现空隙，该离心管直径为25mm，高度为120mm，取预先放置于培养皿中发芽的植物种子，放置于离心管的土壤中心，称取3g相同土壤覆盖种子，采用移液枪向土壤中缓慢添加10ml纯净水，之后将离心管放置于人工温室中培养植物，根据离心管中土壤干湿度及时添加水分，且要一次浇透；

（4）添加标记氨基酸：培养15-35天后，植物根系长满整个离心管，离心管中土壤均为根际土壤，选取土壤含水量相对较低的时期，采用2mm直径的铁棒打三个小孔，采用移液枪向土壤中添加含200μmolL^-1的¹³C,¹⁵N-Glycine溶液10ml；

（5）土壤植物样品处理及测定：吸收4h后迅速将植物连同土壤从离心管中取出，将土壤与根系分离开来后，迅速用自来水冲洗根系，之后在超声波中清洗5min，用0.5molL^-1氯化钙冲洗三次，纯净水冲洗三次，最后放置于冻干机冷冻干燥后，称重，用球磨仪粉碎，样品高温消煮氧化，全氮含量用半微量凯氏定氮仪蒸馏，最后用0.01molL-1硫酸滴定，采用同位素质谱仪测定植株不同部位的15N丰度值，在处理植物样品的同时，将土壤放于4℃冰箱中保存，之后测定土壤的理化性质，与氨基酸吸收量进行线性相关分析，研究影响土壤氨基酸生物有效性的主要土壤因素。

2.根据权利要求1所述的一种测定影响根际土壤氨基酸有效性因素的方法，其特征在于，步骤（1）采集具有代表性的地带性土壤，采集点位于典型的土壤类型带，砖红壤位于广西、广东、海南，赤红壤位于湖南、广西、广东，红壤位于江西、湖北、湖南，黄褐土、黄棕壤位于江苏、安徽，棕壤位于河北、河南，暗棕壤、黑土、漂黑土位于东北三省。

3.根据权利要求1所述的一种测定影响根际土壤氨基酸有效性因素的方法，其特征在于，步骤（4）中采用2mm直径的铁棒从上到下垂直打三个小孔。

4.根据权利要求1所述的一种测定影响根际土壤氨基酸有效性因素的方法，其特征在于，步骤（5）中所述的理化性质为全氮、碱解氮、有机质、CEC、pH、土壤机械组成、水溶性各氮素类型含量、吸附态氨基酸含量。