[发明专利]一种高效定点编辑植物基因组的CRISPR/Cas9系统

权利要求书

1.含有启动子pYAO的表达盒甲；所述表达盒甲中由所述启动子pYAO启动Cas9核酸酶的编码基因表达；

所述启动子pYAO为序列表序列1自5'末端第1-1012位所示的DNA分子。

2.如权利要求1所述的表达盒甲，其特征在于：所述表达盒甲自5’端至3’端依次包括如下原件：所述启动子pYAO、所述Cas9核酸酶的编码基因和终止子；

所述Cas9核酸酶为序列表中序列2所示的蛋白质。

3.含有权利要求1或2所述表达盒甲的重组质粒。

4.如权利要求3所述的重组质粒，其特征在于：所述重组质粒还包括表达盒乙；所述表达盒乙中由AtU6-26启动子启动sgRNA转录；

所述AtU6-26启动子为序列表序列7自5'末端第1-448位所示的DNA分子。

5.如权利要求3所述的重组质粒，其特征在于：所述重组质粒还包括功能片段乙；所述功能片段乙自5’端至3’端依次包括AtU6-26启动子、供crRNA的编码基因插入的多克隆位点区段和tracrRNA区段。

6.如权利要求4所述的重组质粒，其特征在于：所述表达盒乙如序列表中序列9自5'末端第8941-9575位所示。

7.如权利要求5所述的重组质粒，其特征在于：所述功能区段乙如序列表中序列7所示。

8.一种定向编辑植物基因组的方法，为方法(c1)或方法(c2)：

方法(c1)包括如下步骤：通过将权利要求4或6所述重组质粒导入出发植物，从而定向编辑所述出发植物的基因组中的所述sgRNA的靶基因；

方法(c2)包括如下步骤：(1)根据出发植物中预期进行定向编辑的靶基因设计crRNA；(2)将所述crRNA的编码基因插入权利要求5或7所述重组质粒的多克隆位点区段中，得到重组质粒甲；(3)将所述重组质粒甲导入所述出发植物，从而定向编辑所述出发植物的基因组中的所述靶基因。

9.一种定向编辑植物基因组的系统，包括表达CRISPR/Cas9系统的重组质粒，其特征在于：所述重组质粒中启动Cas9表达的启动子为权利要求1中所述启动子pYAO。

10.权利要求1中所述启动子pYAO在启动目的基因表达中的应用。