[发明专利]ECMA复合微生物菌剂的制备方法

权利要求书

1.ECMA复合微生物菌剂的制造方法，其特征在于该方法按下述步骤进行：

（1）斜面菌种培养：在装有马铃薯培养基的试管中，接种菌株青霉菌(黑龙江棵乐农业有限公司提供)，在26℃～34℃斜面培养一周，直至气生的孢子堆呈青绿色；

（2）摇瓶菌种培养基与菌种培养：

培养基：葡萄糖10～50g/l，KH₂PO₄0.5～2g/l，K₂HPO₄0.5～3g/l，(NH₄)₂SO₄1～4g/l，MgSO₄·7H₂O0.2g/l，玉米浆0.5～3g/l，CaCO₃5～20g/l，调节pH至7.0～8.0；

在装有摇瓶菌种培养基的三角瓶中，接种上述斜面培养菌种，在150转/分摇床上，26～37℃，培养20—28小时；

（3）液体发酵罐种子培养基与扩大培养：

培养基：葡萄糖10～200g/l，KH₂PO₄1～2g/l，K₂HPO₄1～3g/l，(NH₄)₂SO₄2～6g/l，MgSO₄·7H₂O0.2g/l，氨基酸颗粒1～10g/l，PH值为5.5～8.5，发酵温度28～40℃，通风比0～1.0vvm，搅拌转速为20～500rpm，培养时间为36～54小时。

（4）固体发酵：

培养基：谷糠或稻糠35～55%、淀粉8～16%、氨基酸颗粒4～10%、麦麸0.5～2%、磷矿石粉10～15%、草炭灰或秸秆粉20～30%，按此比例配制的固体发酵培养基加水25～40%，pH6.0～8.0。

在装有上述培养基的固体培养箱中接种发酵罐种子液；接种量为5～10%，在26～37℃进行培养，通风量为1:0.2～0.8，发酵136～168小时，产生孢子后，在55～80℃烘干得到所述的块状或粉末状产品。

（5）均匀混合：

将上述1—4步骤制成的粉末状产品与枯草牙孢杆菌（菌种BacillussubtilisY1336来源自台湾百泰生物科技公司）微生物制剂按1：1的比例均匀混合后，制成ECMA。

2.根据权利要求1所述的青霉菌孢子粉的制造方法，其特征在于所述摇瓶菌种培养基配方中各组成成分在其范围内均可按比例用于培养；其最佳配方为葡萄糖30g/l，KH₂PO₄2g/l，K₂HPO₄2.3g/l，(NH₄)₂SO₄3g/l，MgSO₄·7H₂O0.2g/l，玉米浆2g/l和控制条件为30℃培养26小时。

3.根据权利要求1所述的青霉菌孢子粉的制造方法，

其特征在于其特征在于所述发酵罐种子培养基配方中各组成成分在其范围内均可按比例用于培养；其最佳配方为葡萄糖120g/l，KH₂PO₄2g/l，K₂HPO₄2.5g/l，(NH₄)₂SO₄5g/l，MgSO₄·7H₂O0.2g/l，氨基酸颗粒8g/l和在控制条件为PH值7.5，发酵温度32℃，通风比0.8vvm，搅拌转速为200rpm，培养时间为48小时。

4.根据权利要求1所述的青霉菌孢子粉的制造方法，

其特征在于所述发酵罐种子培养基配方中各组成成分在其范围内均可按比例用于培养；其最佳固体发酵培养基配方（重量比）为谷糠或稻糠40%、淀粉12%、氨基酸颗粒8%、麦麸1.5%、磷矿石粉12%、草炭灰或秸秆粉25%，按此比例配制的固体发酵培养基加水30%。

5.根据权利要求1所述的青霉菌孢子粉的制造方法，其特征在于所述发酵罐种子液的加入量是固体发酵物料重量的5～10%，其最佳加入量是固体发酵物料重量的8%。