[发明专利]一种原代肝细胞体外复极性的培养方法有效
| 申请号： | 201510578764.3 | 申请日： | 2015-09-11 |
| 公开（公告）号： | CN105112356B | 公开（公告）日： | 2018-11-30 |
| 发明（设计）人： | 汪艳;杨金连 | 申请（专利权）人： | 南方医科大学南方医院 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 北京市盈科律师事务所 11344 | 代理人： | 马丽丽 |
| 地址： | 510000 广东省广州市白云*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 肝细胞 体外 极性 培养 方法 | ||
1.一种原代肝细胞体外复极性的培养方法，其特征在于：原代肝细胞上样于微孔培养板后，其中，原代肝细胞的密度为4-6×106个/mL，按照300μL/孔的上样量上样于微孔培养板；
静置5-10min，50g-250g离心1-10min，细胞种植密度为8.9×107±4.9×106个/cm3，单位空间肝细胞占用比例为88.5％±3.1％；
去除微孔培养板表面多余的细胞悬液，加入肝细胞表型无血清培养液进行培养。
2.根据权利要求1所述的原代肝细胞体外复极性的培养方法，其特征在于：离心条件为100g-250g离心2-5min。
3.根据权利要求2所述的原代肝细胞体外复极性的培养方法，其特征在于：离心条件为100g离心2min。
4.根据权利要求1所述的原代肝细胞体外复极性的培养方法，其特征在于：肝细胞的培养时间为12h以上。
5.根据权利要求4所述的原代肝细胞体外复极性的培养方法，其特征在于：肝细胞的培养时间为12h至120h。
6.根据权利要求5所述的原代肝细胞体外复极性的培养方法，其特征在于：肝细胞的培养时间为12h至48h。
7.根据权利要求6所述的原代肝细胞体外复极性的培养方法，其特征在于：肝细胞的培养时间为12h至24h。
8.根据权利要求1所述的原代肝细胞体外复极性的培养方法，其特征在于：肝细胞表型无血清培养液包含基础培养基HepatoZYME SFM、2mM L-谷氨酰胺、60μM HEPES、50μM地塞米松和1×青霉素/链霉素双抗。
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