[发明专利]一种脂蛋白磷脂酶A2测定试剂盒及其使用方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种脂蛋白磷脂酶A2测定试剂盒及其使用方法。

背景技术

脂蛋白相关性磷脂酶A2是磷脂酶A2超家族的成员。循环中的脂蛋白相关性磷 脂酶A2是一种主要由巨噬细胞产生的反映血管炎症的特异性标记物,在低密度脂蛋白 的氧化、促进动脉粥样硬化以及冠心病和卒中的形成等方面发挥重要作用。脂蛋白相关性 磷脂酶A2水平升高是预测冠心病和卒中风险的一种独立危险因子。但目前所使用的关于 脂蛋白磷脂酶A2测定试剂盒其准确性低，且操作复杂，不易推广。

发明内容

本发明的目的在于提供一种脂蛋白磷脂酶A2测定试剂盒及其使用方法，其通过胶 乳增强免疫比浊法，操作简单，准确性高，便于推广。

为了达到上述目的，本发明的技术方案是：

一种脂蛋白磷脂酶A2测定试剂盒，包括第一检测液、第二检测液，第一检测液包括第一 检测液磷酸盐缓冲液、聚乙二醇，各组份的组成按重量百分比计分别为：第一检测液磷酸盐 缓冲液95—99%，聚乙二醇1—5%；第二检测液包括第二检测液磷酸盐缓冲液、鼠抗人Lp- PLA2单克隆抗体的致敏乳胶颗粒，各组份的组成按重量百分比计分别为：第二检测液磷酸 盐缓冲液97—99%，鼠抗人Lp-PLA2单克隆抗体的致敏乳胶颗粒1—3%。

第一检测液包括第一检测液磷酸盐缓冲液、聚乙二醇，各组份的组成按重量百分 比计分别为：第一检测液磷酸盐缓冲液98.7%，聚乙二醇1.3%；第二检测液包括第二检测液 磷酸盐缓冲液、鼠抗人Lp-PLA2单克隆抗体的致敏乳胶颗粒，各组份的组成按重量百分比 计分别为：第二检测液磷酸盐缓冲液99%，鼠抗人Lp-PLA2单克隆抗体的致敏乳胶颗粒1%。

所述第一检测液磷酸盐缓冲液为PH值为6.5的磷酸盐缓冲液。

所述第二检测液磷酸盐缓冲液为PH值为8.0的磷酸盐缓冲液。

所述聚乙二醇采用聚乙二醇6000。

一种脂蛋白磷脂酶A2测定试剂盒的使用方法，包括如下步骤：首先准备第一试剂 管、第二试剂管、第三试剂管；接着在第一试剂管内加入第一检测液240μL，蒸馏水12μL混合 均匀并孵育5分钟，同时在第二试剂管内加入第一检测液240μL，标准液12μL混合均匀并孵 育5分钟，同时在第三试剂管内加入第一检测液240μL，检测液12μL混合均匀并孵育5分钟； 然后在第一试剂管内加入第二检测液加入70μL混合均匀并孵育1分钟，同时在第二试剂管 内加入第二检测液加入70μL混合均匀并孵育1分钟，同时在第三试剂管内加入第二检测液 加入70μL混合均匀并孵育1分钟；最后分别读取第一试剂管、第二试剂管、第三试剂管在 546nm波长检测反应液吸光度的变化，其变化程度与标准液中的Lp-PLA2含量成正比， 从而测得检测液中Lp-PLA2含量。

所述孵育时的温度均为37℃。

检测液中的脂蛋白磷脂酶A2在磷酸盐缓冲系统中与试剂中鼠抗人Lp-PLA2单 克隆抗体的致敏乳胶颗粒发生抗原抗体反应，在促聚剂聚乙二醇作用下产生凝集以使浊度 上升，在546nm波长检测反应液吸光度的变化，其变化程度与样本中的Lp-PLA2含量成 正比。

本发明的有益效果是：一种脂蛋白磷脂酶A2测定试剂盒及其使用方法，其通过胶 乳增强免疫比浊法，操作简单，准确性高，便于推广。

具体实施方式

实施例1

一种脂蛋白磷脂酶A2测定试剂盒，包括第一检测液、第二检测液，第一检测液包括第一 检测液磷酸盐缓冲液、聚乙二醇，各组份的组成按重量百分比计分别为：第一检测液磷酸盐 缓冲液98.7%，聚乙二醇1.3%；第二检测液包括第二检测液磷酸盐缓冲液、鼠抗人Lp-PLA2 单克隆抗体的致敏乳胶颗粒，各组份的组成按重量百分比计分别为：第二检测液磷酸盐缓 冲液99%，鼠抗人Lp-PLA2单克隆抗体的致敏乳胶颗粒1%。

所述第一检测液磷酸盐缓冲液为PH值为6.5的磷酸盐缓冲液。所述第二检测液磷 酸盐缓冲液为PH值为8.0的磷酸盐缓冲液。所述聚乙二醇采用聚乙二醇6000。