[发明专利]一种鸡气分证模型的构建方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种鸡疾病模型的构建方法，具体地说是一种鸡气分证模型的构建方法。

背景技术

随着集约化养鸡业的发展，养殖规模不断扩大，饲养密度逐渐提高，料肉比不断降低，鸡群发病率逐年提高，用于疾病防控的化学药物不断增加，食品药物残留和微生物耐药性有逐年增加的趋势。中药在预防和治疗鸡病方面具有灵活配伍、随症加减、标本兼治、低毒、高效等特点，是预防和治疗鸡病的首选药物，是减少药物残留，提高禽产品质量，保证人类健康的绿色、高效的新兽药。中药是祖国医学的重要组成部分，对证下药是保证药效的首要前提。因此构建科学合理的病证模型是中药研究的重要任务，否则一切均无从谈起。

由于鸡呼吸系统特有的气囊结构，外界空气可直接进入体内，病原菌极易感染呼吸系统，而出现以甩鼻、流鼻液、眼泪、呼噜、气喘等为主要症状的外感温热病的初期和中期症状。外感温热病是鸡常见的疾病，卫分证是外感温热病的初期症状，若卫分证不解，即可以发展为气分证。由于鸡气囊分布全身，鸡舍内空气质量较差，病情如不能及时控制，极易转为营血证，出现高热、拉稀、组织器官严重出血、神经症状，甚至导致严重死亡，因此鸡卫分证阶段和气分证阶段的治疗非常重要，中药研制尤为迫切。同时由于鸡卫分证阶段持续时间较短，治疗时一般处在气分证阶段或者是从卫分证到气分证的转化阶段，因此，建立气分证模型更为重要。

构建鸡气分证模型首先想到的是鸡传染性支气管炎病毒(Infectious Bronchitis of Chickems,IBV)，但单纯感染病毒鸡群不发病，无卫分证特征。用新城疫病毒构建模型，弱毒株不发病，无临床症状；中等毒力和强毒株，由于毒力较强，卫、气分证时间持续较短，很快转入营血证，死亡率极高，不适于气分证阶段的治疗。构建鸡气分证的模型已成为制约相关中药研究的瓶颈。

发明内容

本发明克服了上述现有技术的不足，提供了一种鸡气分证模型的构建方法。本发明采用20-23℃的饲养温度(正常饲养温度为30℃左右)可造成冷应激，降低雏鸡机体的抵抗力，再通过滴鼻方式(外感)感染以呼吸道症状为主的传染性支气管炎病毒M41株，成功构建稳定的气分证模型，为预防和治疗鸡气分证中药的研究提供可靠的疾病模型。

本发明的技术方案是：一种鸡气分证模型的构建方法，其特征是，以饲养于SPF鸡隔离器中的海兰褐雏公鸡或SPF雏鸡为样本；将鸡隔离器温度控制在20-23℃(冷应激)，再采用鸡传染性支气管炎病毒M41株两侧鼻孔滴鼻的方式进行病毒感染；病毒感染后凡出现流鼻液或鼻孔黏液堵塞的均判为发病；病毒感染后雏鸡100％发病，病程持续6天以上，以后逐渐好转直至自然痊愈的判定为鸡气分证模型构建成功。

优选的，所述鸡传染性支气管炎病毒M41株病毒液的EID50为1×10-6.5/0.1mL，用量为0.2～0.4mL/只，更优选的用量为0.3mL/只。

优选的，选用7～11日龄的海兰褐雏公鸡或SPF雏鸡为样本的，更优选的选用11日龄的海兰褐雏公鸡或SPF雏鸡为样本。

构建成功的模型鸡表现出：精神沉郁——甩鼻——喷嚏——流鼻液(如图1所示)——鼻孔黏液堵塞(如图2所示)——自然痊愈(一般10天左右)的疾病进程。

本发明所选鸡传染性支气管炎病毒M41株的病原学特性如下：鸡传染性支气管炎病毒(IBV)至少有14个血清型，M41是引起呼吸性传染性支气管炎的美国标准株之一。可通过呼吸、直接接触感染家禽及污染的垫料、设备或其他污染物传播，主要侵害鸡呼吸系统，出现打喷嚏、流鼻液、咳嗽、呼吸困难、气管啰音、鼻孔黏液堵塞等症状。

本发明的有益效果是：

(1)雏鸡正常饲养温度为30℃左右，而本发明20-23℃的饲养温度可造成冷应激，降低机体的抵抗力，通过滴鼻方式(外感)感染以呼吸道症状为主的传染性支气管炎病毒M41株，成功构建稳定的气分证模型；

(2)本发明的鸡气分证模型构建方法简单、易操作，构建的模型临床症状明显、发病迅速、发病率高(100％)、病程长(气分证维持时间6天以上)，模型稳定、可靠(气分证后逐渐好转直至自然痊愈，不会出现进一步恶化，如营血证、死亡等)，适合于鸡气分证防治用中药的研究。

附图说明

图1为感染鸡鼻流黏液图；其中A图自然状态下鸡鼻流黏液图，B图为经挤压后黏液大量流出图。

图2为感染鸡黏液堵塞鼻孔图。

具体实施方式

实施例1 海兰褐雏鸡气分证模型的构建

1 材料和方法