[发明专利]甲基营养型芽孢杆菌AR3、枯草芽孢杆菌AR4、解淀粉芽孢杆菌AR10及应用

说明书

本发明提供了芽孢杆菌AR4及其制备抗作物青枯病菌剂方面的应用，本发明通过在宣恩县健康烟田中取土样、筛选、分析、培养后得到枯草芽孢杆菌AR4，并通过大量田间实验验证：AR4生防芽孢杆菌单独使用，或与另外两株从宣恩县健康烟田中分离筛选得到的甲基营养型芽孢杆菌AR3以及解淀粉芽孢杆菌AR10混合使用时，防治作物青枯病效果好，针对性强，污染小，制成菌剂后可长期保存，方便于田间应用，进一步丰富了芽孢杆菌生防菌研究领域的成果，对以后相关研究工作具有指导意义。

技术领域

本发明具体涉及三株生防芽孢杆菌，甲基营养型芽孢杆菌AR3、枯草芽孢杆菌AR4、解淀粉芽孢杆菌AR10，以及在制备抗烟草、番茄、辣椒、姜的青枯病菌剂中的应用，属于农业微生物学技术及生物防治技术领域。

背景技术

作物青枯病是由青枯雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum)引起的严重危害农业生产的重要病害，是一种制约着农业生产的主要病害，在我国多个省区普遍发生。青枯病是一种维管束疾病，发病时，作物的根、茎、叶均会发病，但主要集中在根、茎部位，其典型症状是发病后叶片枯萎但仍然呈绿色，因此得名青枯病。

近年来，为了防治植物病害，化学药剂的滥用对环境的污染已十分严重。为了解决这一问题，人们开始寻找一种对环境无害且防效良好的新的植物病害防治策略。利用有益微生物来防治植物病害逐渐受到重视，植物病害生防微生物已涉及细菌、真菌、放线菌、病毒等多个种群。

芽孢杆菌(Bacillus spp.)是一种应用较多的生防细菌。关于芽孢杆菌的防病作用机制已经进行了大量的研究，目前普遍认为的生防机制主要有营养和空间位点竞争、分泌抗菌物质、诱导植物产生抗性、溶菌作用等方面，其防病效果是多种机制的综合结果。此外，芽孢杆菌还能激发植物的诱导抗性，从而提高植物的抗病能力。芽孢杆菌也可以在真菌菌丝上吸附并伴随其生长，然后产生溶菌物质最终溶解菌丝并杀死病原真菌。

目前，虽然化学杀菌剂在植物病害防治方面仍占主导地位，但是芽孢杆菌类生防菌剂因其高效、针对性强、无毒无污染等优势逐渐受到重视。

发明内容

本发明的目的是为了克服现有化学杀菌剂效率低、针对性弱、污染大等缺陷，提供三株生防芽孢杆菌：甲基营养型芽孢杆菌AR3、枯草芽孢杆菌AR4、解淀粉芽孢杆菌AR10，以及其在制备抗作物青枯病菌剂方面的应用。

为实现上述目的，首先本发明提供一种甲基营养型芽孢杆菌，分类命名为甲基营养型芽孢杆菌AR3，Bacillus methylotrophicus AR3，已于2015年4月27日保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏地址为中国.武汉.武汉大学，保藏编号为CCTCC NO：M2015248。

本发明还提供上述甲基营养型芽孢杆菌在制备抗烟草、番茄、辣椒、姜的青枯病菌剂中的应用。

本发明同时也提供了上述甲基营养型芽孢杆菌的青枯病防治使用方法，具体步骤如下：将甲基营养型芽孢杆菌AR3培养后，获得的发酵液，对植株苗进行茎基部喷淋，单株植株苗所喷淋的发酵液含有的甲基营养型芽孢杆菌AR3数量大于等于10⁹CFU。

第二，本发明提供一种枯草芽孢杆菌，分类命名为枯草芽孢杆菌AR4，Bacillussubtilis AR4，已于2015年4月27日保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏地址为中国.武汉.武汉大学，保藏编号为CCTCC NO：M 2015249。

本发明还提供上述枯草芽孢杆菌在制备抗烟草、番茄、辣椒、姜的青枯病菌剂中的应用。

本发明同时也提供了上述枯草芽孢杆菌的青枯病防治使用方法，具体步骤如下：将枯草芽孢杆菌AR4培养后，获得的发酵液，对植株苗进行茎基部喷淋，单株植株苗所喷淋的发酵液含有的枯草芽孢杆菌AR4数量大于等于10⁹CFU。