[发明专利]一种维生素H的提取纯化方法

说明书

技术领域

本发明属于维生素提取、合成技术领域，特别是涉及一种维生素H的提取纯化方法。

背景技术

维生素H是一种含硫元素的水溶性B族维生素，100多年前作为酵母生长因子被发现，随后又在蛋黄和肝脏中发现。维生素H在生物体内作为酶的辅因子参与羧化、脱羧和转羧反应，起着将羧基从供体转移到受体的运载体作用。维生素H的生物学作用自从发现以来作为食品和化妆品添加剂，广泛应用于畜牧业、医药、生物医学检测、发酵工业等多个领域，全球市场每年需求量较高，超过了200吨。

目前，国内采用合成法和发酵法生产维生素H，但采用发酵法生产维生素H的提取、纯化工艺没有相关的文献报道。

发明内容

本发明的目的就在于提供一种有效提高提取收率，降低成本，减少环境污染，实现稳定、高效生产的维生素H的提取纯化方法。

为实现上述目的所采取的技术方案为：

一种维生素H的提取纯化方法，其特征在于包括如下工艺步骤：

1)预处理：首先将维生素H发酵液调节pH至7.1～7.5，静置20～40min，然后升温至60～80℃，再次静置40～60min，后降至室温，加入吸附剂，充分搅拌，继续静置80～100min，用不锈钢金属网过滤，得到维生素H滤液；

2)将过程1)所得的维生素H滤液稀释，升温至35～40℃后依次进行陶瓷膜过滤、超滤和纳滤处理，所得纳滤滤液升温至60～80℃，然后冷却结晶，固液分离，干燥和筛分即可。

所述过程1)中，调节pH采用的是质量浓度为10～30％碳酸钠溶液。

所述过程1)中，过滤后的不锈钢金属网用去离子水冲洗，至冲洗液体积等同于发酵液体积时停止冲洗，该冲洗液与维生素H滤液混合；所述不锈钢金属网的过滤精度为300～500μm。

所述过程1)中，吸附剂为重金属吸附剂，其加入量为维生素H发酵液质量的0.01～0.05％。重金属吸附剂可以选用重金属吸附剂H2061。

所述过程2)中，稀释是指在维生素H滤液加入去离子水，其加量为滤液体积的20～40％。

所述过程2)中，陶瓷膜过滤过程中，压力控制在0.3～0.4MPa，陶瓷膜为管束式多孔陶瓷膜材质为氧化铝，截留分子量为5KD。

所述过程2)中，超滤温度控制在30～35℃，压力控制在0.2～0.3MPa；超滤采用中空纤维超滤膜，材质为PVDF，膜孔径为0.01μm。

所述过程2)中，在纳滤处理前，先将超滤滤液降至室温，再加入去离子水稀释维生素H，使其化学效价降至500～1000μ/ml，然后进行纳滤。

所述过程2)中，纳滤是采用陶氏纳滤膜NF90-400/34i脱盐型纳滤膜，纳滤压力控制在2～2.5MPa，纳滤流速300～400L/h，纳滤的浓缩体积倍数为3～5倍，纳滤结束，采用去离子水顶洗8～10min。

所述过程2)中，冷却结晶过程为：按照10～12℃/h的降温速率进行冷却，期间，连续慢速恒流导入纳滤滤液体积的5～10％的反溶剂去离子水，当出现结晶现象时，快速加入纳滤滤液总亿的0.1～0.5％的晶种维生素H，至温度降至-10～-5℃时停止降温和去离子水的填加，继续搅拌20～40min，然后静置2～4h即可。

所述过程2)中，干燥是采用双锥混粉机，调节进风温度至120～130℃，排风温度至50～80℃。

所述过程2)中，超滤过程中，加入透析水，该透析水为陶瓷膜过滤的滤液，当首次陶瓷膜过滤的滤液体积达到发酵液体积的30％时，将其稀释3倍作为透析水，连续加入2次。

所述过程2)中，晶种维生素H用量(g)＝维生素H滤液的化学效价(u/ml)×体积(m³)×比例系数(％)。

本发明的技术效果为：

1)本发明建立了一种利用维生素H发酵液制备维生素H的方法。

2)总收率在85％以上。

3)成品质量符合相关规定。

具体实施方式

下面用实例予以说明本发明，应该理解的是，实例是用于说明本发明而不是对本发明的限制。本发明的范围与核心内容依据权利要求书加以确定。

下述实施例中维生素H发酵液是采用产氨短杆菌，通过二级发酵模式得到维生素H发酵液，该发酵培养基中的碳源主要是葡萄糖和淀粉，氮源主要是豆饼粉、蛋白胨和酵母粉。

材料来源：重金属吸附剂H2061由上海辉建实业有限公司提供。

实施例1