[发明专利]一株高效转化富马酸生产L-天冬酰胺的工程菌及其应用在审
| 申请号： | 201510445371.5 | 申请日： | 2015-07-27 |
| 公开（公告）号： | CN105154379A | 公开（公告）日： | 2015-12-16 |
| 发明（设计）人： | 程池;张奇;徐友强;裴疆森;李金霞;刘波 | 申请（专利权）人： | 中国食品发酵工业研究院 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12P13/20;C12R1/19 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 100015 北京*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 高效 转化 富马酸 生产 天冬 工程 及其 应用 | ||
【权利要求书】：
1.本发明公开一株基因工程菌E.coli11022S/pET28-asnACICC11033S。
2.如权利要求1所述基因工程菌株，是一株用于生产l-天冬酰胺的基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌是含有l-天冬酰胺合成酶基因载体pET28-asnA，宿主为高产L-天冬氨酸酶的E.coliCICC11022S，l-天冬酰胺合成酶基因来源于E.coliJM109或者其他能够表达相同功能酶的微生物。
3.如权利要求2所述基因工程菌，其特征在于，可以高效表达l-天冬酰胺合成酶和L-天冬氨酸酶，并转化富马酸生产l-天冬酰胺；转化体系以氨水调pH7-9，葡萄糖0.01-0.03M（或0.8-1.2MATP），氯化镁1-3mM，富马酸0.8-1.2M，菌体浓度为OD600nm=10-20，25-50oC，30-80rpm搅拌，转化6-14h。
4.如权利要求3所述转化过程，优选体系为pH8.0，0.02M葡萄糖，2mM氯化镁，底物富马酸浓度为1M，菌体浓度为OD600=12，37oC，50rpm，10h。
5.如权利要求3所述转化过程，葡萄糖通过活菌体细胞ATP再生系统产生ATP，为L-天冬酰胺合成酶转化L-天冬氨酸生产L-天冬酰胺提供ATP。
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