[发明专利]小麦穗长主效QTL的紧密连锁标记及其应用有效
| 申请号: | 201510441007.1 | 申请日: | 2015-07-24 |
| 公开(公告)号: | CN105063185B | 公开(公告)日: | 2018-04-13 |
| 发明(设计)人: | 倪中福;柴岭岭;彭惠茹;孙其信;逯腊虎;贾立加;姚颖垠;胡兆荣;李慧敏 | 申请(专利权)人: | 中国农业大学 |
| 主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司11245 | 代理人: | 关畅,张立娜 |
| 地址: | 100094 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 麦穗 长主效 qtl 紧密 连锁 标记 及其 应用 | ||
技术领域
本发明属于生物技术领域,涉及一种小麦穗长主效QTL的紧密连锁标记及其应用。
背景技术
小麦是世界上的重要粮食作物之一,养活了世界上35%的人口。世界范围内小麦的育种目标是不断提高小麦产量。小麦单产取决于三个产量因素,即单位面积成穗数、穗粒数和籽粒重量。这三个产量因素是提高小麦产量的重要组成成分。
小麦的籽粒生长于穗部,因此穗部性状与三个产量因素密切相关。除此之外,穗部参与抽穗后的光合作用,对于籽粒灌浆起重要作用,尤其是干旱环境中。穗部形态结构主要包括穗长、小穗密度和可育小花数且这些性状都属于数量性状。
前人对于穗部性状尤其是易于考查的穗长性状展开了诸多研究。例如,有研究表明穗长性状与小穗密度也有很高的相关性。另外,穗长(SPL)与根部生物量、秸秆生物量、收获指数以及籽粒产量成正相关。虽然穗越长,密实度越小,但可以降低赤霉病的感病率,从而减少由于病害引起的产量损失和品质下降。
目前,小麦产量及相关性状的QTL定位和克隆研究是小麦数量性状研究的热点。
发明内容
本发明的第一个目的是提供一种用于鉴定或辅助鉴定小麦穗长性状的引物对。
本发明所提供的用于鉴定或辅助鉴定小麦穗长性状的引物对,为能够扩增得到如下DNA片段的引物对:所述DNA片段是以小麦基因组DNA为模板,采用序列表中序列1和序列2所示引物对进行PCR扩增所得的DNA片段。
具体的,所述引物对由序列表中序列1和序列2所示的两条单链DNA组成。
所述引物对的制备方法也属于本发明的保护范围。
所述引物对的制备方法,包括将所述两条单链DNA分别单独包装的步骤。
本发明的第二个目的是提供一种用于鉴定或辅助鉴定小麦穗长性状的试剂盒。
本发明所提供的用于鉴定或辅助鉴定小麦穗长性状的试剂盒,含有所述引物对和如下中的至少一种:dNTP、DNA聚合酶和PCR扩增缓冲液。
所述试剂盒的制备方法也属于本发明的保护范围。
所述试剂盒的制备方法,包括将引物对和如下中的至少一种分别单独包装的步骤:dNTP、DNA聚合酶和PCR扩增缓冲液。
本发明的第三个目的是提供一种鉴定或辅助鉴定小麦杂交后代的穗长性状的方法。
本发明所提供的鉴定或辅助鉴定小麦杂交后代的穗长性状的方法,具体可包括如下步骤:
(a1)分别以小麦A、小麦B以及由所述小麦A和所述小麦B杂交而来的小麦杂交后代群体中的每个个体的基因组DNA为模板,采用所述引物对(序列1和序列2)分别进行PCR扩增,得到所述小麦A的PCR产物、所述小麦B的PCR产物以及所述小麦杂交后代群体中的每个个体的PCR产物;
所述小麦A的穗长大于所述小麦B的穗长;
(a2)将所述小麦A的PCR产物、所述小麦B的PCR产物以及所述小麦杂交后代群体中的每个个体的PCR产物分别进行电泳,根据电泳结果按照如下确定所述小麦杂交后代的穗长性状:与所述小麦A的PCR产物的电泳条带的带型相同的所述小麦杂交后代的穗长大于或候选大于与所述小麦B的PCR产物的电泳条带的带型相同的所述小麦杂交后代。
本发明的第四个目的是提供一种从小麦杂交后代群体中获得穗长相对较长的个体的方法。
本发明所提供的从小麦杂交后代群体中获得穗长相对较长的个体的方法,具体可包括如下步骤:
(b1)分别以小麦A、小麦B以及由所述小麦A和所述小麦B杂交而来的小麦杂交后代群体中的每个个体的基因组DNA为模板,采用所述引物对(序列1和序列2)分别进行PCR扩增,得到所述小麦A的PCR产物、所述小麦B的PCR产物以及所述小麦杂交后代群体中的每个个体的PCR产物;
所述小麦A的穗长大于所述小麦B的穗长;
(b2)将所述小麦A的PCR产物、所述小麦B的PCR产物以及所述小麦杂交后代群体中的每个个体的PCR产物分别进行电泳,选取所述小麦杂交后代群体中与所述小麦A的PCR产物的电泳条带的带型相同的个体,即为或候选为所述小麦杂交后代群体中所述穗长相对较长的个体。
对于上述两种方法,在本发明中,所述小麦A具体为小麦品种农大3338;所述小麦B具体为小麦品种京冬6号。相应的,所述小麦杂交后代群体具体为由小麦品种农大3338和小麦品种京冬6号杂交而来的小麦杂交后代群体。
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