[发明专利]一种超滤处理黄霉素发酵液的方法有效
| 申请号: | 201510433960.1 | 申请日: | 2015-07-22 |
| 公开(公告)号: | CN105037451B | 公开(公告)日: | 2017-10-27 |
| 发明(设计)人: | 陈斌;李蓉;俱名扬;郭燕彬;杨凯迪;马晓迅 | 申请(专利权)人: | 西北大学 |
| 主分类号: | C07H13/12 | 分类号: | C07H13/12;C07H1/06 |
| 代理公司: | 西安通大专利代理有限责任公司61200 | 代理人: | 王霞 |
| 地址: | 710069 *** | 国省代码: | 陕西;61 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 超滤 处理 霉素 发酵 方法 | ||
1.一种超滤处理黄霉素发酵液的方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)将黄霉素发酵液用去离子水连续超滤1h,弃去透析液;
2)将步骤1)超滤截留的黄霉素发酵液用含有胶束调节剂的水溶液继续超滤1h,收集富集黄霉素的透析液;
所述的胶束调节剂为甲酰胺或尿素;
超滤所用超滤膜的材质为聚醚砜、聚砜、聚丙烯腈或聚酰胺。
2.根据权利要求1所述的一种超滤处理黄霉素发酵液的方法,其特征在于,超滤所用超滤膜的截留分子量为3000~50000。
3.根据权利要求1所述的一种超滤处理黄霉素发酵液的方法,其特征在于,在步骤1)前还包括对黄霉素发酵液进行预处理,具体操作为:将黄霉素发酵液于4℃冷藏过夜,然后在8000r/min的条件下离心10min。
4.根据权利要求1所述的一种超滤处理黄霉素发酵液的方法,其特征在于,在步骤2)后还包括对富集黄霉素的透析液采用色谱法进行精制的步骤。
5.根据权利要求4所述的一种超滤处理黄霉素发酵液的方法,其特征在于,精制采用正相色谱法、反相色谱法或离子交换色谱法。
6.根据权利要求5所述的一种超滤处理黄霉素发酵液的方法,其特征在于,正相色谱的填料为硅胶,其粒径为20~150μm;
离子交换色谱填料的骨架为聚甲基丙烯酸酯类,其功能基团为-CH2-CH2-NH-(C2H5)2,粒径为20~75μm。
7.根据权利要求5所述的一种超滤处理黄霉素发酵液的方法,其特征在于,反相色谱法具体操作为:
将富集黄霉素的透析液的pH值调节至3.0~4.5,以50~250cm/hr的流速泵入装填有反相色谱填料的层析柱,以相同的流速,选取pH值为8.30的20%甲醇溶液为A流动相,以纯甲醇为B流动相,按照0~40%B流动相线性梯度洗脱40min,再用40%B流动相等梯度洗脱至黄霉素A组分完全解吸,合并高纯度黄霉素A组分,去除溶剂后冷冻干燥,得到精制后的黄霉素A组分产品。
8.根据权利要求7所述的一种超滤处理黄霉素发酵液的方法,其特征在于,所用的反相色谱填料孔径为粒径为20~75μm;反相色谱填料为硅胶改性的C8、C18填料,或者为聚合物基质的色谱填料;
聚合物基质为苯乙烯-二乙烯苯聚合物或聚甲基丙烯酸酯类聚合物。
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