[发明专利]脐带间充质干细胞的制备方法有效
| 申请号： | 201510395470.7 | 申请日： | 2015-07-08 |
| 公开（公告）号： | CN104988118A | 公开（公告）日： | 2015-10-21 |
| 发明（设计）人： | 曾宪卓;鲁菲 | 申请（专利权）人： | 深圳爱生再生医学科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0775 | 分类号： | C12N5/0775 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 518057 广东省深圳市南山区*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 脐带 间充质 干细胞 制备 方法 | ||
1.一种脐带间充质干细胞的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
获取脐带组织；
将所述脐带组织用沃顿胶消化液进行消化处理，并搜集消化液；其中，所述沃顿胶消化液包括透明质酸酶和硫酸软骨素ABC酶；
从所述消化液中分离提取脐带间充质干细胞。
2.如权利要求1所述的沃顿胶消化液，其特征在于，所述透明质酸酶和硫酸软骨素ABC酶的质量/酶活比为0.05～2mg/U。
3.如权利要求1所述的沃顿胶消化液，其特征在于，所述沃顿胶消化液还包括缓冲体系。
4.如权利要求3所述的沃顿胶消化液，其特征在于，所述缓冲体系为PBS缓冲系或Tris-HCl缓冲系。
5.如权利要求1至4任一项所述的脐带间充质干细胞的制备方法，其特征在于，从所述消化液中分离提取脐带间充质干细胞步骤之后，还包括：
将所述分离提取得到的脐带间充质干细胞进行大量培养。
6.如权利要求1至4任一项所述的脐带间充质干细胞的制备方法，其特征在于，所述消化处理过程中消化时间为40min以上。
7.如权利要求1至4任一项所述的脐带间充质干细胞的制备方法，其特征在于，所述消化处理过程中温度控制为35～37℃。
8.如权利要求1至4任一项所述的脐带间充质干细胞的制备方法，其特征在于，从所述消化液中分离提取脐带间充质干细胞步骤包括：
将所述消化液于200～400目筛网过滤后，取悬浊滤液；
将所述悬浊滤液用完全培养液进行终止消化处理；
将所述终止消化处理后的悬浊滤液用PBS洗涤后进行离心处理，并搜集离心沉淀物。
9.如权利要求8所述的脐带间充质干细胞的制备方法，其特征在于，所述完全培养液为含8～12%FBS的DMEM/F12培养液。
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