[发明专利]多元电致化学发光DNA传感器及用于病毒的检测

权利要求书

1.一种多元电致化学发光DNA传感器，其特征在于：是由如下步骤制备得到：

1)首先，使用1.0μm～0.05μm纳米氧化铝粉末α-Al₂O₃将玻碳电极GCE抛光，抛光后的玻碳电极用蒸馏水、乙醇和蒸馏水超声清洗去除吸附的物质，然后纯氮气环境下吹干，得到表面抛光的玻碳电极；

2)将10～30μL、0.10～0.3mg·mL^-1氧化石墨烯GO水溶液滴到步骤1)制备的玻碳电极表面，20～30℃下干燥，在GCE表面得到GO薄膜，记为GO/GCE；

3)在0V到-1.5V的电位下、0.1V s^-1～0.5V s^-1的扫描速率下、pH＝7.0～7.5的磷酸盐缓冲溶液PBS中，以玻碳电极作为工作电极、铂丝电极作为对电极、饱和甘汞电极作为参比电极，连续扫描步骤2)得到的GO/GCE10～20个周期，氧化石墨烯GO经过电化学还原得到石墨烯片层GNs，从而在GCE表面得到GNs薄膜，记为GNs/GCE；

4)将5～10μL、530～550nm CdTe QDs标记的乙肝病毒捕获DNA和5～10μL、600～620nm CdTe QDs标记的丙肝病毒捕获DNA溶液一同滴到步骤3)制备的GNs/GCE表面，20～30℃下干燥，在GCE表面得到CdTe QDs标记的病毒捕获DNA/GNs复合薄膜，记为CdTe QDs标记的病毒捕获DNA/GNs/GCE；

5)将步骤4)制备的CdTe QDs标记的病毒捕获DNA/GNs/GCE浸到与其碱基互补的乙肝病毒目标DNA和丙肝病毒目标DNA的混合溶液中，90～95℃下混合5～10min，然后快速冷却到20～30℃，在GCE表面得到病毒目标DNA/CdTe QDs标记的病毒捕获DNA/GNs复合薄膜，记为病毒目标DNA/CdTe QDs标记的病毒捕获DNA/GNs/GCE；

6)将步骤5)制备的病毒目标DNA/CdTe QDs标记的病毒捕获DNA/GNs/GCE进一步浸到与病毒捕获DNA碱基互补的Au NPs标记的乙肝病毒探针DNA和Au NPs标记的丙肝病毒探针DNA的混合溶液中，90～95℃下混合5～10min，然后快速冷却到20～30℃，在GCE表面得到Au NPs标记的病毒探针DNA/病毒目标DNA/CdTe QDs标记的病毒捕获DNA/GNs复合薄膜，记为Au NPs标记的病毒探针DNA/病毒目标DNA/CdTe QDs标记的病毒捕获DNA/GNs/GCE；从而得到结构为Au NPs标记的病毒探针DNA/病毒目标DNA/CdTe QDs标记的病毒捕获DNA/GNs/GCE的多元电致化学发光DNA传感器。