[发明专利]一组糖基转移酶及其应用在审
| 申请号: | 201510313727.X | 申请日: | 2015-06-09 |
| 公开(公告)号: | CN105177100A | 公开(公告)日: | 2015-12-23 |
| 发明(设计)人: | 周志华;严兴;王平平;魏勇军;魏维;许云鹏;李晓东;杨成帅 | 申请(专利权)人: | 中国科学院上海生命科学研究院 |
| 主分类号: | C12P33/00 | 分类号: | C12P33/00;C12N9/10;C12N15/54;C12N5/10;A01H5/00 |
| 代理公司: | 上海一平知识产权代理有限公司 31266 | 代理人: | 陆凤;马莉华 |
| 地址: | 200031 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一组 糖基转移酶 及其 应用 | ||
1.一种体外糖基化方法,其特征在于,包括步骤:
在糖基转移酶存在下,将糖基供体的糖基转移到四环三萜类化合物的以下位点上:
C-3和/或C-6位的第一个糖基上以延伸糖链;
从而形成糖基化的四环三萜类化合物;
其中,所述的糖基转移酶为如SEQIDNO.:61所示的糖基转移酶或其衍生多肽。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的衍生多肽选自:
将SEQIDNO.:61所示氨基酸序列的多肽经过一个或几个氨基酸残基的取代、缺失或添加而形成的、或是添加信号肽序列后形成的、并具有糖基转移酶活性的衍生多肽;或
氨基酸序列与SEQIDNO.:61氨基酸序列的同源性≥85%(较佳地≥90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%),并具有糖基转移酶活性的衍生多肽;
其中,所述糖基转移酶活性指能将糖基供体的糖基转移到四环三萜类化合物C-3和/或C-6位的第一个糖基上以延伸糖链的活性。
3.一种分离的多肽,其特征在于,所述的多肽选自下组:
(a)具有SEQIDNO.:61所示氨基酸序列的多肽;
(b)将SEQIDNO.:61所示氨基酸序列的多肽经过一个或几个氨基酸残基的取代、缺失或添加而形成的、或是添加信号肽序列后形成的、并具有糖基转移酶活性的衍生多肽;
(c)序列中含有(a)或(b)中所述多肽序列的衍生多肽;
(d)氨基酸序列与SEQIDNO.:61氨基酸序列的同源性≥85%(较佳地≥90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%),并具有糖基转移酶活性的衍生多肽;
其中,所述糖基转移酶活性指能将糖基供体的糖基转移到四环三萜类化合物C-3和/或C-6位的第一个糖基上以延伸糖链的活性。
4.一种分离的多核苷酸,其特征在于,所述的多核苷酸为选自下组的序列:
(A)编码权利要求3所述多肽的核苷酸序列;
(B)编码如SEQIDNO.:61所示多肽或其衍生多肽的核苷酸序列;
(C)如SEQIDNO.:60所示的核苷酸序列;
(D)与SEQIDNO.:60所示序列的同源性≥90%(较佳地≥91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%)的核苷酸序列;
(E)在SEQIDNO.:60所示核苷酸序列的5’端和/或3’端截短或添加1-60个(较佳地1-30,更佳地1-10个)核苷酸所形成的核苷酸序列;
(F)与(A)-(E)任一所述的核苷酸序列互补的核苷酸序列。
5.一种载体,其特征在于,所述的载体含有权利要求4所述的多核苷酸。
6.权利要求3所述分离的多肽的用途,其特征在于,它被用于催化以下一种或多种体外反应,或被用于制备催化以下一种或多种反应的催化制剂:
(i)将来自糖基供体的糖基转移到四环三萜类化合物的C-3位的第一个糖基上,延伸糖链;
(ii)将来自糖基供体的糖基转移到四环三萜类化合物的C-6位的第一个糖基上,延伸糖链;
(iii)将来之糖基供体的糖基与四环三萜类化合物的C-6位糖链的末端糖基进行置换,从在C-3和/或C-6位的第一个糖基上延伸糖链。
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