[发明专利]假病毒包装系统及其用途

权利要求书

1.一种假病毒包装载体，其是在载体pSG3.Δenv中nef基因的上游且Δenv基因的下游可操作地连接有荧光素酶基因和调节该基因转录的启动子；其中所述的启动子为CMV启动子。

2.权利要求1的假病毒包装载体，其中所述的荧光素酶选自萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶。

3.权利要求2的假病毒包装载体，其中所述萤火虫荧光素酶基因的序列如SEQ ID NO：3所示。

4.权利要求1的假病毒包装载体，其中所述CMV启动子的序列如SEQ ID NO：18所示。

5.权利要求1-4任一项的假病毒包装载体，其中所述荧光素酶基因和调节该基因转录的启动子的序列如SEQ ID NO：6所示。

6.权利要求5的假病毒包装载体，其中所述假病毒包装载体具有SEQ ID NO：7所示的序列。

7.一种假病毒包装系统，其包含权利要求1-6任一项的假病毒包装载体和至少一种真核表达载体；其中所述的真核表达载体含有病毒的膜蛋白基因。

8.权利要求7的假病毒包装系统，其中所述的真核表达载体是将载体pcDNA3.1(+)中CMV启动子至T7启动子的序列替换为：

(1)CAG启动子；

(2)LTR启动子；或

(3)包含有人巨细胞病毒主要即刻早期蛋白基因(Human cytomegalovirus major immediate-early protein gene)增强子/启动子、人巨细胞病毒主要即刻早期蛋白基因外显子1和人巨细胞病毒主要即刻早期蛋白基因内含子1的序列。

9.权利要求8的假病毒包装系统，其中所述的包含有人巨细胞病毒主要即刻早期蛋白基因(Human cytomegalovirus major immediate-early protein gene)增强子/启动子、人巨细胞病毒主要即刻早期蛋白基因外显子1和人巨细胞病毒主要即刻早期蛋白基因内含子1的序列如SEQ ID NO：16所示。

10.权利要求9的的假病毒包装系统，其中所述真核表达载体具有如SEQ ID NO：17所示的序列。

11.权利要求7-10任一项的假病毒包装系统，其中所述病毒为有包膜病毒。

12.权利要求11的假病毒包装系统，其中所述有包膜病毒选自DNA病毒、RNA病毒和逆转录病毒。

13.权利要求12的假病毒包装系统，其中所述有包膜病毒选自冠状病毒，疱疹病毒，痘病毒，嗜肝病毒，丝状病毒，弹状病毒，流感病毒，副粘病毒，黄病毒，囊膜病毒，布尼亚病毒和逆转录病毒。

14.权利要求13的假病毒包装系统，其中：

所述冠状病毒为SARS-CoV；

所述嗜肝病毒为丙肝病毒；

所述丝状病毒为Ebola病毒；

所述弹状病毒为狂犬病毒；

所述副粘病毒为麻疹病毒或呼吸道合胞病毒；或

所述黄病毒为登革病毒。

15.宿主细胞，其含有权利要求1-6任一项的假病毒包装载体或权利要求7-14任一项的假病毒包装系统。

16.权利要求15的宿主细胞，其中所述细胞选自HEK293、HEK293T和HEK293FT细胞。

17.假病毒，其由权利要求1-6任一项的假病毒包装载体、权利要求7-14任一项的假病毒包装系统或权利要求15或16的宿主细胞制备得到。

18.权利要求1-6任一项的假病毒包装载体、权利要求7-14任一项的假病毒包装系统或权利要求15或16的宿主细胞在制备假病毒中的用途。

19.权利要求18的用途，其中所述的假病毒为有包膜病毒的假病毒。

20.权利要求19的用途，其中所述有包膜病毒选自DNA病毒、RNA病毒和逆转录病毒。

21.权利要求20的用途，其中所述有包膜病毒选自冠状病毒，疱疹病毒，痘病毒，嗜肝病毒，丝状病毒，弹状病毒，流感病毒，副粘病毒，黄病毒，囊膜病毒，布尼亚病毒和逆转录病毒。