[发明专利]甲胎蛋白异质体AFP－L3定量检测试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种甲胎蛋白异质体AFP－L3定量检测试剂盒，其由甲胎蛋白(AFP)标准品、凝集素溶液、对照液、包被酶标板、辣根过氧化物酶(HRP)标记的AFP单克隆抗体溶液和辅助试剂组成。

2.根据权利要求1所述的AFP－L3定量检测试剂盒，其特征在于，所述包被酶标板是由普通甲胎蛋白单克隆抗体包被酶标板而制作的，所述普通甲胎蛋白单克隆抗体可通过商业渠道获得。具体过程为：将上述单克隆抗体用0.05M碳酸缓冲液稀释后加入酶标板各孔，每孔100μl，吸附过夜，用吐温磷酸盐缓冲液洗板，再用含牛血清白蛋白的吐温磷酸盐缓冲液封闭过夜，甩干后晾干，即获得单克隆抗体包被酶标板。

3.根据权利要求1所述的AFP－L3定量检测试剂盒，其特征在于，所述凝集素溶液为：含6μg/ml的扁豆凝集素和0.1mg/ml的氨基三乙酸的30mmol/L的PBS缓冲液，pH值为6.5。

4.根据权利要求1所述的AFP－L3定量检测试剂盒，其特征在于，所述辣根过氧化物酶(HRP)标记的AFP单克隆抗体溶液为含1mg/L的AFP单克隆抗体和3％酪蛋白的Tris缓冲液，pH值为6.5。

5.根据权利要求1所述的AFP－L3定量检测试剂盒，其特征在于，所述对照液由阴性对照和阳性对照组成，阳性对照通过收集肝癌病人腹水过滤除菌、分装获得，阴性对照通过收集健康正常人血清，过滤除菌、分装获得。

6.根据权利要求1所述的AFP－L3定量检测试剂盒，其特征在于，所述辅助试剂包括对照缓冲液、底物溶液、显色液、反应终止液和清洗缓冲液，各试剂具体为：

对照缓冲液为30mmol/L的PBS(pH6.5)缓冲液；

底物溶液为磷酸-柠檬酸缓冲液(pH5.5)配制的3％过氧化氢溶液；

显色液为四甲基联苯胺(TMB)的甲醇溶液，浓度为0.1mg/ml；

反应终止液为3mol/L硫酸；

清洗缓冲液为30mmol/L的PBS(pH6.5)配制的0.05％吐温20溶液。