[发明专利]一种果蔗化学消毒组培方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种植物组织培养方法，具体涉及一种果蔗化学消毒组培方法，属生物技术领域。

背景技术

果蔗(Saccharum officimarum.L)是甘蔗属热带种中具有大茎皮薄、质脆、汁多味甜的一类品种，具有解渴充饥、清凉解毒、消除疲劳等功效。果蔗以其独特的风味，丰富的营养及实用的药物价值，已成为人们越来越喜爱的水果。我国果蔗资源比较丰富，根据蔗茎的颜色可分为黄皮果蔗、黑皮果蔗、白皮果蔗和青皮果蔗，其中以两广地区种植的黑皮果蔗最为有名。

近年来，果蔗的种植面积越来越大，但生产上也随之面临两个关键的问题：一是果蔗受到多种病虫害侵染，市场上的果蔗种茎通常带有花叶病、宿根矮化病等病害，造成品种退化，导致蔗茎缩短、节间变短、产量下降、品质变劣；二是果蔗属无性繁殖作物，繁殖系数小，不利于良种的快速推广。应用脱毒种苗组培快繁技术既可以扩大其繁殖系数，从而实现规模化繁殖；又能减轻病毒感染，有效控制病毒危害，保持果蔗的优良特性。因此探索果蔗的组培快速繁殖方式具有重要意义。

果蔗脱毒种苗组培快繁的成本主要包括组培苗生产所需的培养基、设施设备、供电成本、耗材和人工成本。常规的果蔗组织培养方法要求接种过程、培养过程都在无菌培养基中进行，无菌消毒耗能大，人工操作成本高。如果能通过培养基改造，获得既保证果蔗组织正常生长，又具有杀菌、抗菌或抑菌功能的培养基，菌类也就不能在培养基中滋生。由于这种改造后的培养基不需要进行高温高压灭菌，一方面可以降低果蔗组织培养对设施设备的要求，尤其不需要高温高压灭菌所需配置的高压锅设备，缩减了投资成本，电能消耗也将大幅度降低；另一方面，采用这种培养基开展果蔗组织培养，组培环节大为简化，人工操作的速度大幅提高，从而降低了人工成本。此外，由于改造后的培养基自身具有杀菌、抗菌或抑菌作用，能有效控制组织培养过程中的污染问题，又不会对果蔗生长产生毒害或抑制，即不影响果蔗的正常生长，又从根本上简化了果蔗组织培养。

发明内容

本发明的目的是提供一种果蔗化学消毒组培方法。

本发明的目的是通过以下方法实现的。

本发明的一种果蔗化学消毒组培方法，包括培养容器消毒、培养基配制、种茎处理及诱导培养、增殖培养、壮苗培养、生根培养和瓶苗移栽，其特征在于：

1.培养容器消毒：将培养瓶瓶盖及接种用的不锈钢盘在100mg/L次氯酸钠+100mg/L丙酸钙的水溶液中浸泡不少于10h，保存备用；

2.培养基配制：诱导培养基为MS+2.0～5.0mg/L 6-BA+0.1～1.0mg/L NAA+50～100mg/L次氯酸钠+50～100mg/L特美汀+50～100mg/L丙酸钙+20g/L蔗糖+3.0g/L琼脂粉，pH5.8；增殖培养基为：MS+0.5～2.0mg/L 6-BA+0.1～1.0mg/L NAA+50～100mg/L次氯酸钠+50～100mg/L特美汀+50～100mg/L丙酸钙+20g/L蔗糖+3.0g/L琼脂粉，pH5.8；壮苗培养基为MS+0.1～0.5mg/L 6-BA+1.0-2.0mg/L KT+0.5～1.0mg/L NAA+50～100mg/L次氯酸钠+50～100mg/L特美汀+50～100mg/L丙酸钙+20g/L蔗糖+3.0g/L琼脂粉，pH5.8；生根培养基为1/2MS+3.0～5.0mg/L NAA+50～100mg/L次氯酸钠+50～100mg/L特美汀+50～100mg/L丙酸钙+20g/L蔗糖+3.0g/L琼脂粉，pH5.8；所述MS培养基为1962年，Murashige和Skoog公开的MS培养基；所述6-BA，指6-苄氨基嘌吟；所述NAA，指〆-萘乙酸；所述KT，指6－糠氨基嘌吟；配制培养基时，先称各培养基配方中蔗糖和琼脂粉，加培养基总体积1/2的自来水，加热至琼脂粉完全溶解，再按各培养基配方配齐其他原料后，定容、然后用1mol/L的NaOH或1mol/L的HCl调pH值至5.8，分装到消毒过的培养容器中，封口，冷却凝固后备用；