[发明专利]细菌性阴道病联合检测试剂及使用该试剂的方法

说明书

技术领域

本发明涉及阴道病检测技术领域，具体公开一种细菌性阴道病联合检测试剂及使用该试剂的方法。

背景技术

阴道炎是阴道粘膜及粘膜下结缔组织的炎症，临床上以白带的性状发生改变以及外阴瘙痒灼痛为主要特点，感染累及尿道时，可有尿痛、尿急等症状。其中细菌性阴道病(BV)是最常见的妇科炎症。

目前，临床上诊断BV的标准为，符合以下4项指标中的3项可诊断为BV：1、阴道PH＞4.5；2、阴道分泌物增多，变稀如奶状，有异味；3、胺试验阳性，即在阴道分泌物中加入10％KOH产生鱼腥味；4、阴道涂片中可见线索细胞。此即为传统的Amsel法。

传统诊断BV的方法存在很多不足之处。主要体现为，一些与感染无关的因素如近期性交、阴道灌洗、行经或是存在大量子宫颈粘液等同样可以导致阴道PH值升高，或使分泌产生异味；胺试验中对气味的鉴别因人而异；而对于用作BV诊断最佳标志的线索细胞的识别则受到显微设备的质量、样本的采集以及操作者的经验等诸多因素的共同影响，主观性强，因而很难对判定结果进行统计和比较。

发明内容

本发明目的是提供一种细菌性阴道病联合检测试剂，该试剂采用干化学酶技术，通过测定阴道分泌物中生化成份的变化，可有效鉴别细菌性阴道病。

为了实现上述目的，发明采用了以下的技术方案：一种细菌性阴道病联合检测试剂，包括过氧化氢浓度测定反应液、白细胞酯酶活性测定反应液和唾液酸甘酶活性测定反应液；

所述过氧化氢浓度测定反应液包括如下组分及配比：90mlPH值为6.6的0.1M柠檬酸缓冲液、1.0g-3.0g的蔗糖、0.5-1.5g的聚乙烯吡咯烷酮、0.05ml-0.2ml的40mMVC、0.2g-1.0g的2，4，6-三溴-3-羟基苯甲酸、5ml-10ml的750U/ml过氧化物酶溶液、0.2ml-2ml的80mM4-氨基安替吡啉；

所述白细胞酯酶活性测定反应液由A液和B液组成，所述A液的组分及配比为：100ml的纯化水、1g-5g的四硼酸钠、0.5g-2g的NaCl、0.1g-1g的聚乙烯吡咯烷酮、0.1g-0.5g的胆酸钠、0.5g-2g的七水硫酸镁；所述B液的组分及配比为：100.0ml的无水甲醇、0.2g-1.5g的L-酒石酸、0.2g-2g的白细胞稳定剂、0.02g-0.1g的1，10癸二醇、0.2g-2g的5-溴-4-氯-3-吲哚乙酯；

所述唾液酸甘酶活性测定反应液的组分及配比为：100.0ml的纯化水、0.5g-3g的无水乙酸钠、0.2g-2g的聚乙烯吡咯烷酮、0.5g-5g的蔗糖、0.05g-3g的5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-N-乙酰神经氨酸钠盐、0.02ml-0.08ml的0.02M柠檬酸。

一种使用上述试剂的方法，

将过氧化氢浓度测定反应液浸泡滤纸，烘干，制成干化学纸片，即可用于检测；若干化学制片呈红色或紫红色为阴性，表示可能有大量乳酸杆菌存在，阴道菌群正常；不显色或淡黄色为阳性，指示阴道菌群失调，阴道环境病态或处于亚健康状态；

将白细胞酯酶活性测定反应液先用A液浸泡滤纸，烘干后用B液浸泡，再烘干，制成干化学纸片，即可用于检测；干化学纸片不显色为阴性，表示患者阴道内正常；蓝绿色为阳性，表明患者阴道内有炎症反应；

用唾液酸甘酶活性测定反应液浸泡滤纸，再烘干，制成干化学纸片，即可用于检测；干化学纸片不显色为阴性，表示患者阴道内正常；显红色或紫红色为阳性，表示可能感染细菌性阴道病。

本发明包含三个独立检测项目，分别为：

1.过氧化氢浓度测定：分泌物中过氧化氢经过氧化物酶作用，释放出新生态氧，后者在4-氨基安替吡啉存在下，使2，4，6-三溴-3-羟基苯甲酸氧化呈红色或紫红色，呈色深度与过氧化氢浓度成正比。呈红色或紫红色为阴性，表示可能有大量乳酸杆菌存在，阴道菌群正常；不显色或淡黄色为阳性，指示阴道菌群失调，阴道环境病态或处于亚健康状态。

2.白细胞酯酶活性测定：白细胞酯酶水解5-溴-4-氯-3-吲哚乙酯，释放出溴吲哚基，后者在有氧的条件下呈蓝绿色，呈色深度与白细胞酯酶活性成正比。不显色为阴性；蓝绿色为阳性，表明患者阴道内有炎症反应。

3.唾液酸苷酶活性测定：唾液酸苷酶水解5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-N-乙酰神经氨酸钠盐，释放出溴吲哚基，后者在重氮盐的条件下显红色或紫红色。不显色为阴性；显红色或紫红色为阳性，表示可能感染细菌性阴道病。

本发明的有益效果在于：采用上述试剂及其方法后，具备以下优势：