[发明专利]采用特异性引物鉴别汾远2号远志的方法有效
| 申请号： | 201510244426.6 | 申请日： | 2015-05-13 |
| 公开（公告）号： | CN104818337B | 公开（公告）日： | 2017-06-20 |
| 发明（设计）人： | 张福生;王丹丹;许晓双;秦雪梅;张丽增 | 申请（专利权）人： | 山西大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 山西五维专利事务所(有限公司)14105 | 代理人： | 张福增 |
| 地址： | 030006 山*** | 国省代码： | 山西;14 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 采用 特异性 引物 鉴别 远志 方法 | ||
1.一种采用特异性引物鉴别汾远2号远志的方法，其特征在于，由以下步骤完成：
1)提取远志样品中的DNA；
2)以步骤1)中提取的DNA为模板，使用特异性引物进行PCR扩增反应；
3)用琼脂糖凝胶电泳分析PCR产物，有PCR扩增条带者即为汾远2号远志，无PCR扩增条带者则非汾远2号远志；
所述的特异性引物是如下(1)至(8)引物对中的任意一对：
(1)上游引物F1：5＇CGACCGTTGGACACGTATT 3＇
下游引物R1：5＇TCGCCCCAAGAGATGTGA 3＇
(2)上游引物F2：5＇CGACCGTTGGACACGTATT 3＇
下游引物R2：5＇TCGCCCCAAGAGATCAGA 3＇
(3)上游引物F3：5＇CGACCGTTGGACACGAATT 3＇
下游引物R3：5＇TCGCCCCAAGAGATGTGA 3＇
(4)上游引物F4：5＇CGACCGTTGGACACGAATT 3＇
下游引物R4：5＇TCGCCCCAAGAGATCAGA 3＇
(5)上游引物F5：5＇CGACCGTTGGACACGTATT 3＇
下游引物R5：5＇ACCAAGTATCGCATTTCGC 3＇
(6)上游引物F6：5＇CGACCGTTGGACACGAATT 3＇
下游引物R6：5＇ACCAAGTATCGCATTTCGC 3＇
(7)上游引物F7：5＇CGACCGTTGGACACGTATT 3＇
下游引物R7：5＇TCGCCCCAAGAGATGAGA 3＇
(8)上游引物F8：5＇CGACCGTTGGACACGAATT 3＇
下游引物R8：5＇TCGCCCCAAGAGATGAGA 3＇
所述PCR扩增反应体系为：
所述第(1)至第(4)对引物对的PCR反应条件为：93℃5min；93℃30s，60℃30s，72℃30s，共35个循环；72℃5min，10℃10min；第(5)至第(8)对引物对的PCR反应条件为：93℃5min；93℃30s，65℃30s，72℃30s，共30个循环；72℃5min，10℃10min。
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