[发明专利]采用SLE法分离猪尿中的莱克多巴胺的方法有效
| 申请号: | 201510243114.3 | 申请日: | 2015-05-12 |
| 公开(公告)号: | CN104880519B | 公开(公告)日: | 2016-11-23 |
| 发明(设计)人: | 陈学松;赖秀梅;温志芳;陈启钊;郭振旺;吴岚 | 申请(专利权)人: | 广西壮族自治区梧州食品药品检验所 |
| 主分类号: | G01N30/06 | 分类号: | G01N30/06 |
| 代理公司: | 广州市越秀区海心联合专利代理事务所(普通合伙) 44295 | 代理人: | 黄为;蔡国 |
| 地址: | 543000 广西壮*** | 国省代码: | 广西;45 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 采用 sle 分离 中的 多巴胺 方法 | ||
1.一种采用SLE法分离猪尿中的莱克多巴胺的方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤1:样品预处理;收集猪尿,首先加入β-盐酸葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶进行酶解,每毫升的尿液中加入β-盐酸葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶12μL,酶解结束后加入三氯乙酸沉淀猪尿中的蛋白质,加入4倍猪尿体积的Ph范围为8.0~10.0的氨水-氯化铵缓冲液,漩涡混合器混合后离心;取离心后的上清液;
步骤2:将上清液加入到SLE柱后,静置2~4分钟;
步骤3:采用二元洗脱剂对SLE柱洗脱至少两次,接收洗脱液,得到含有莱克多巴胺的洗脱液;
其中,所述的二元洗脱剂为异丙醇和二氧六环的混合物,其中异丙醇和二氧六环的重量比为0.8~1:1。
2.根据权利要求1所述的采用SLE法分离猪尿中的莱克多巴胺的方法,其特征在于,所述的猪尿为1ml,缓冲溶液为4ml,步骤2中所取的上清液为0.5ml。
3.根据权利要求2所述的采用SLE法分离猪尿中的莱克多巴胺的方法,其特征在于,,所述的步骤3中,每次洗脱时所用的洗脱剂为0.5ml。
4.根据权利要求2所述的采用SLE法分离猪尿中的莱克多巴胺的方法,其特征在于,所述的三氯乙酸和猪尿的质量比为1:98~100。
5.根据权利要求1所述的采用SLE法分离猪尿中的莱克多巴胺的方法,其特征在于,所述的步骤1中,漩涡混合器混合处理的时间为0.5~1.5分钟。
6.根据权利要求5所述的采用SLE法分离猪尿中的莱克多巴胺的方法,其特征在于,所述的步骤1中,所述的离心处理的具体操作为:将经混合处理的溶液在离心机中以9000~11000转/分钟的速度离心0.5~1.5分钟。
7.根据权利要求1至6任一所述的采用SLE法分离猪尿中的莱克多巴胺的方法,其特征在于,所述的SLE柱为奥秘山东科技有限公司生产的介质液液萃取SLE柱。
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