[发明专利]假禾谷镰刀菌LAMP的检测引物、反应体系及检测方法

权利要求书

1.一种假禾谷镰刀菌LAMP的检测引物，其特征在于：所述检测引物的序列如下：

外引物FpF35'TCCCACAAATCATTCCCTGG3'

外引物FpB35'AACATACCAATGACGGTGACA3'

内引物FpFIP5'AGGAACCCTTACCGAGCTCGGGCGCATCATCACGTGTCA3'

内引物FpBIP5'CAAGCTCAAAGCCGAGCGTGAAGGAGTCTCGAACTTCCAGA3'。

2.利用权利要求1所述的假禾谷镰刀菌LAMP的检测引物进行LAMP反应的反应体系，其特征在于，25μl反应体系中：

引物混合液：0.2μmol/L外引物FpB3、0.2μmol/L外引物FpF3，1.6μmol/L内引物FpFIP、1.6μmol/L内引物FpBIP；

反应混合液：10mmol/LdNTP、20mmol/LTris-HCl(pH8.8)、10mmol/LKCl、5mmol/LMgSO₄、10mmol/L(NH₄)₂SO₄、0.1%Trintonx-100、0.1mol/L甜菜碱、8UBstDNA聚合酶大片段；

1μl模板DNA，加灭菌双蒸馏水补全到25μl。

3.如权利要求2所述的假禾谷镰刀菌LAMP的反应体系的检测方法，其特征在于：将引物混合液和反应混合液混匀后加入1μl模板DNA，加灭菌双蒸馏水补全到25μl，61~66℃保温30~90min，82℃保温10min，得到的产物中加入有显色剂，轻甩离心管观察，所述显色剂为SYBRGreenI与PCR级DMSO的混合物，SYBRGreenI与PCR级DMSO的体积比为1：9。

4.如权利要求3所述的假禾谷镰刀菌LAMP的检测方法在诊断植物的假禾谷镰刀菌感染情况或鉴别假禾谷镰刀菌中的应用。