[发明专利]鉴定番茄黄化曲叶病毒抗性基因Ty‑1的分子标记方法

权利要求书

1.一种鉴定番茄黄化曲叶病毒抗性基因Ty-1的分子标记方法，该方法包括如下步骤：

步骤1，提取番茄的基因组DNA；

步骤2，用分子标记引物对前述提取的番茄基因组DNA进行PCR扩增，所述分子标记引物的正向引物序列为5’-CGTTCTGCTTAATGTGGCAAT-3’，所述分子标记引物的反向引物序列为5’-CAACGGAGGGAGCATATCAT-3’；

步骤3，对前述PCR扩增产物进行电泳分析，如果电泳图中产生690bp的条带，则表明植株中含有黄化曲叶病毒抗性基因Ty-1，为抗病植株；如果电泳图中产生409bp的条带，则表明植株为含ty-1基因位点的株系，为不抗病植株；

所述步骤3中PCR扩增产物的电泳图中如果同时产生690bp和409bp的条带，表明植株为含Ty-1/ty-1位点的株系，为杂抗植株。

2.如权利要求1所述的鉴定番茄黄化曲叶病毒抗性基因Ty-1的分子标记方法，其特征在于，所述步骤2中PCR扩增的反应条件如下：

PCR的反应体系是：10ng/uL的模板DNA 3μL，10umol/L的正向引物2.5μL，10umol/L的反向引物2.5μL，10mmol/L的dNTP 0.625μL，10×PCR buffer 2.5μL，10mmol/L的Mg²⁺2.5ul，Taq酶1U，补充ddH₂O至25μL；

PCR程序分别为：94℃预变性3min，然后94℃变性30s，退火温度57℃60s，72℃60s，进行35个循环，最后72℃延伸10min。

3.一种鉴定番茄黄化曲叶病毒抗性基因Ty-1的分子标记引物，其特征在于：该引物的正向引物序列为5’-CGTTCTGCTTAATGTGGCAAT-3’，反向引物序列为5’-CAACGGAGGGAGCATATCAT-3’。

4.权利要求3所述的分子标记引物在番茄黄化曲叶病毒抗性基因定位、检测或标记辅助育种中的应用。