[发明专利]一种血型血清学检测方法及实现该方法的自动化检测系统

说明书

技术领域

本发明属于涉及一种血型血清学检测方法及其检测系统。

背景技术

血型血清学的检测方法大致分为两类，一类为手工方法，一类为自动化仪器方法。检测的原理多数都是依据抗原抗体发生凝集反应，人工观察或仪器检测凝集状态从而判断实验结果。人工采用的方法包括试管法和玻片法，观察的准确度依赖经验积累和处理过程的准确程度，对于弱凝集反应，还需要使用其它工具（如显微镜）才能判断。仪器的检测方法大致有两种，一种是使用微柱凝胶卡作为载体，在凝胶微柱介质中，红细胞抗原与相应抗体结合，经低速离心凝集的红细胞悬浮于凝胶上部，未和抗体结合的红细胞则沉于凝胶底部，再通过图像识别给出反应结果。另外一种是平板图像识别法，平板类型还有U形或V形，不凝集的细胞会滚落在中心形成细胞扣，凝集的细胞则会铺满圆孔的底步，再通过对平板上的图像进行识别，从而判断凝集状态。

手工方法的缺点在于大批量实验时操作繁琐，效率较低，实验结果需人工登记而不能实现自动化，且不能保证不存在由于疏忽引起的人为差错；在手工复悬细胞时，如果力度掌握不好，容易破坏弱凝集状态，从而不能得出正确结果。凝胶卡的优点在于灵敏度高，但是价格较高，如果样本出现细菌感染，容易出现假阳性结果。平板图像法处理的速度很快，但是不适合处理需要进行细胞洗涤的实验，往往需要专用细胞洗涤仪器配合。

而且，手工进行血液免疫学试验时，需要将样本和试剂加入标准系列的玻璃试管进行复悬振荡，然后观察实验结果。使用自动化仪器进行检测的时候，由于反应管横截面面积较小，液体流动性差。为了将反应物混匀和复悬，需要较大振荡的力度。

 单纯的依靠振荡力度解决悬浮液复悬的方法，存在以下缺点：

1、如果振荡力度偏小，则抗原抗体阴性反应状态下，附着在离心管底部的物质不易悬浮；

2、如果振荡力度偏大，则抗原抗体的阳性反应状态容易被破坏，尤其是弱凝集反应；

3、震动较大，对零部件的装配可靠性和一致性要求高。

故，人们需要找到一种更合适的方法来解决这些问题。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种可以快速判断实验结果，准确率高，对弱凝集的检出率高，有很好的灵敏度的血型血清学检测方法及其检测系统。

为了改善液体在微量离心管内的振荡复悬效果，本发明人想到在离心管内加入较离心管的管底部小的钢珠或其它材质形状物体的方法，具体为由于离心管在振荡过程中，钢珠或其它材质形状物体等助微量液体悬浮的振荡体在离心管底部运动，会破坏液体的表面张力，带动液体流动，从而将离心管内部的未发生凝集反应的细胞悬浮起来，同时不破坏发生凝集反应的细胞状态，使得结果更为可靠、精确，由此，将其与本发明的其他技术方案融合在一起，形成本发明的技术方案。

本发明所采取的技术方案为：

一种血型血清学自动化检测方法，其特征在于，包含如下步骤：

     步骤1）、在离心管内加入实验所需的样本及试剂，混合之后放入离心机进行离心；

步骤2）、离心之后将离心管采用光通量检测装置，进行第一次光通量检测，检测是否有溶血现象并记下数值；

步骤3）、向离心管中加入较离心管的管底部小的助微量液体悬浮的振荡体，根据相应的试验类型选择合适的振荡频率、幅度对离心管进行振荡复悬，复悬后进行光通量第二次检测并记下数值；由于离心管在振荡过程中，钢珠或其它材质形状物体等助微量液体悬浮的振荡体在离心管底部运动，会破坏液体的表面张力，带动液体流动，从而将离心管内部的未发生凝集反应的细胞悬浮起来，同时不破坏发生凝集反应的细胞状态，大幅降低了原有振荡机构的震动力度，方便有效、可控地改善了微量液体的悬浮效果，满足血液免疫反应的操作要求，使得结果更为可靠、精确；

步骤4）、根据样品种类的不同，选择在相应时间之后，再进行第三次检测并记下数值；

步骤5）、基于不凝集的细胞悬浮在溶液中，对穿过其中的特定波长的光线（如蓝光和绿光）有较强的吸收，即光通量较小，位于溶液另一侧的光电接收器（光电二极管、光电池等）由此产生的光电流会较弱；如果发生了凝集反应，那么大部分细胞落在离心管底部，溶液呈现透明状，光通量较大，对应检测出的光电流较大，对于较弱的凝集反应（如1+、2+），由于若干个细胞聚集在一起，会比不凝集（阴性反应）的细胞沉降的快，对其在一定时间内检测的光通量变化量与阴性反应的变化量明显不同的原理，建立分级反应（阴性，1+、2+、3+、4+）的光通量数学模型；更细分级的话，还可分为（阴性，可疑，1+、2+、3+、4+）的光通量数学模型。