[发明专利]一种具有降糖作用的黑木耳多糖的制备方法

说明书

(一)技术领域

本发明涉及一种具有降糖作用的黑木耳多糖的制备方法。

(二)背景技术

黑木耳[Auricularia auricular(Hook.)Underw，简称AA]属担子菌亚门(Basidiomycotina)、层菌纲(Hymenomycetes)、木耳目(Auriculariales)、木耳科(Auriculariaceae)、木耳属(Auricularia)。我国是世界上黑木耳生产的主要国家之一，占世界黑木耳总产量的90％。

黑木耳中的糖类物质占其干重的70％左右，除含有甘露聚糖、葡聚糖、酸性多糖、几丁质、纤维素等物质外，还含有一些微量成分，如黑色素、酚类化合物等。黑木耳多糖作为具有多种生物活性的天然糖类物质，近年来关于其降血糖方面的报道不断增加，如薛惟建等(中国药科大学学报,1989,20(3):181-183)报道黑木耳多糖可明显增加小鼠Ins分泌，且口服4-7h降血糖作用最显著。Yuan ZM等(Biosci.Biotechnol.Biochem.,1998,62:1898-1903)报道黑木耳多糖能显著降低小鼠血糖、尿糖水平，增强Ins分泌及肝糖原含量。Takeuchi H等(Journal of Nutritional Science and Vitaminology(Tokyo),2004,50(4):300-304)报道中性黑木耳多糖能剂量依赖地降低小鼠血糖、胰岛素、HbA1c和尿糖水平，而酸性多糖无明显降糖效果。武卓(哈尔滨工业大学硕士学位论文,2007.7)从黑木耳中分离获得一种黑木耳多糖AAP3-1(重均分子量11.9kDa)并硫酸酰化(SAAP)，发现AAP3-1和SAAP均可降低小鼠的血糖并升高肝糖原含量，且SAAP的效果优于AAP3-1。于伟(东北林业大学学报，2010,38(6):101-103)将黑木耳多糖与鹿茸提取物复配后，能极显著降低小鼠血糖、血脂(TC、TG、LDL-C)水平，提高HDL-C含量，并可调节糖尿病小鼠的饮食水平。

临床上α-葡萄糖苷酶抑制剂是治疗糖尿病的主要手段之一，其能够与小肠中α-葡萄糖苷酶的活性部位结合，通过竞争抑制α-葡萄糖苷酶(EC3.2.1.20，α-glucosidase)，抑制酶的催化作用，阻止可消化低聚糖水解为单糖，使单糖的吸收时间延后，抑制餐后血糖水平的快速升高，降低餐后血糖。因此，可以采用多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制率反应多糖的降血糖效果。

目前，多糖粗制品的制备方法大致可分为以下几类(见表1)。

表1多糖制备方法及优缺点

与其它来源的材料相比，制备黑木耳多糖具有其特殊性，这是因为黑木耳细胞壁关键组分几丁质和β-葡聚糖，质地坚韧，不易被人体所消化，细胞壁内所含有的多糖类物质很难透过细胞壁，被人体所吸收，因而破壁处理是开展黑木耳深加工首要考虑的问题，是提取细胞内有效成分的关键步骤，破壁可使黑木耳细胞内富含的功能性成分溶出于水中，提高黑木耳的消化吸收率。同时，黑木耳是一种特殊的胶质体真菌，有别于一般常见的食用真菌(如菇类)，且其碳水化合物含量很高，随着黑木耳吸水溶胀后，可溶性部分从组织中流出，增加了提取体系的粘度，给黑木耳多糖的提取制备过程增加了难度，尤其是对于制备过程中需要利用酶催化作用的制备方法十分不利，高粘度不利于酶分子的流动性和扩散。

常见的黑木耳破壁技术：水提法、碱提法、酶解法、超声波法、微波辅助法、超微粉碎法以及复合法等。提取黑木耳多糖时要兼顾得率与活性，超低温均质技术和唾液与人工胃肠液仿生技术是保证低温有效破壁、提高得率与活性的重要手段之一。

超低温均质技术是将冷冻与粉碎均质2种单元操作相结合，使物料在冻结状态下，利用超低温的脆性实现粉碎。它可以粉碎在常温下难以粉碎的物料，使物料颗粒流动性更好、粒度分布更理想，不会因粉碎使物料发热而出现氧化、分解、变色等现象，特别适合诸如功效成分之类物料的粉碎。唾液与人工胃肠液仿生技术是模拟人体的整个消化过程，从唾液充分混合到人工胃液与人工肠液作用使多糖充分溶出。人体消化液很独特，不同于体外水溶液的特性，表现为生物活性特性、pH值特性及胃肠液分泌物质特性。如唾液中含有13种消化酶、11种矿物质、9种维生素、多种有机酸和激素等。因此，本发明采用超低温均质技术结合唾液与人工胃肠液协同作用于黑木耳，并以得率与降血糖活性为指标，使提取率和活性大为提高，对于进一步发掘黑木耳多糖的营养价值与药用价值具有实际意义。

(三)发明内容