[发明专利]一种具有降糖作用的黑木耳多糖的制备方法

权利要求书

1.一种黑木耳多糖的提取方法，其特征在于，所述的提取方法按如下步骤进行：

(1)取干燥黑木耳子实体经机械粗粉碎，过40～60目筛，获得黑木耳粉，将所得黑木耳粉与去离子水按1：10～12的料液质量比混合，充分溶胀后，于-80～-85℃冷冻干燥12～24h，之后先机械粗分，再进一步使用高压均质机，在均质压力10～12MPa条件下，均质5～8min，获得黑木耳超细粉碎酱；

(2)取步骤(1)所得黑木耳超细粉碎酱预热至35～40℃，再与新鲜的唾液混合，充分振荡混合10～30min得黑木耳超细粉碎酱和唾液的混合物；其中，所述黑木耳超细粉碎酱与唾液的质量比为1～5：1；

(3)将步骤(2)黑木耳超细粉碎酱和唾液的混合物与去离子水按质量比1：3～5混合，用HCl水溶液调pH至1.7～1.9，加入人工胃液，开始磁力搅拌，速度130～180r/s，在35～40℃水浴中保温30～180min后，加入NaHCO₃溶液和磷酸缓冲液维持体系pH为6.6～7.0，再加入终浓度为2.0wt％～3.0wt％胰酶溶液，磁力搅拌，速度130～180r/s，在35～40℃水浴中保温30～60min后，升温至85～90℃灭酶5～6min得到混合液；其中，所述人工胃液的体积用量以所述黑木耳超细粉碎酱的质量计为2～3mL/g；所述胰酶溶液的体积用量以所述黑木耳超细粉碎酱的质量计为1～2mL/g；

(4)取步骤(3)所得混合液离心，得到上清液与沉淀物，弃去沉淀物，取上清液加入硅藻土与活性炭的混合物，充分搅拌后过滤，取滤液，先用10～20kD的聚砜膜进行膜过滤，收集未滤过膜的大分子浓缩液，再进一步用50～60kD的聚砜膜进行膜过滤，收集滤过膜的小分子溶液，将收集的小分子溶液进行干燥得到黑木耳多糖。

2.如权利要求1所述的黑木耳多糖的提取方法，其特征在于步骤(1)中，所述冷冻干燥的时间为15h。

3.如权利要求1所述的黑木耳多糖的提取方法，其特征在于步骤(2)中，所述新鲜的唾液按如下方法获得：健康志愿者于餐后2～2.5h，首先用200～250mL蒸馏水漱口，咽下口腔内全部唾液后，口腔微张、头低位，8～10min后将下切牙与下唇之间的唾液收集于无菌试管内，收集后即刻使用。

4.如权利要求1所述的黑木耳多糖的提取方法，其特征在于步骤(3)中，加入人工胃液后，所述在水浴中保温的时间为120min。

5.如权利要求1所述的黑木耳多糖的提取方法，其特征在于步骤(3)中，用于调pH的HCl水溶液为1mol/L。

6.如权利要求1所述的黑木耳多糖的提取方法，其特征在于步骤(3)中，所述NaHCO₃溶液为1mol/L，所述磷酸缓冲液为0.1mol/L。

7.如权利要求1所述的黑木耳多糖的提取方法，其特征在于步骤(4)中，所述聚砜膜进行膜过滤时，均采用切向流过滤技术，即液体流动方向与过滤方向呈垂直的过滤形式。

8.如权利要求1所述的黑木耳多糖的提取方法，其特征在于步骤(4)中，所述小分子溶液进行干燥的方法为：在-80℃冷冻4～6h后，转移到冷冻干燥机，在机器运作温度-60℃～-40℃下，冷冻干燥2～3d。