[发明专利]不同层级严重吸入性损伤动物模型的建立方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种不同层级严重吸入性损伤动物模型的建立方法，属于动物模型的构建技术领域。

背景技术

严重吸入性损伤、感染以及MODS(多器官功能障碍综合征)是导致烧伤患者死亡最主要的三因素，其中严重吸入性损伤不仅易诱发ALI/ARDS(急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征)，也极易引起肺部进而全身感染，如病情进入中后期则难以避免的出现肺纤维化，当病情仍然得不到控制最终将发展成为MODS，不难看出，在严重吸入性损伤—ALI/ARDS—肺部及全身感染—(肺纤维化)—MODS这一病情发展模式中，严重吸入性损伤成为最重要的启动因素或罪魁祸首，诚如研究资料指出，单纯吸入性损伤这一独立因素就使烧伤患者的病死率增加20％左右，重度吸入性损伤患者死亡率则可高达60～80％，因此重度吸入性损伤已成为严重影响烧伤救治成功最重要的因素。

目前国内外将左右主支气管至肺泡这一广泛区域的损伤归入重度吸入性损伤。然而当不同级别(部位)支气管(如：大气道的叶、段支气管，小气道的小、细、终末支气管与呼吸区的呼吸性支气管)与肺泡损伤后，会造成以损伤支气管为中心的不同区域范围内相邻的肺泡与支气管的损伤(刘群,邓诗琳,王玉莲,等.纤维支气管镜诊断和治疗吸入性损伤[J].中华整形外科杂志,1999,15(3):218)，所引起的病理以及病理生理变化、肺部及全身并发症(如ALI/ARDS、肺部及全身感染、肺纤维化和MODS等)发生时间与发生率、治疗措施(如呼吸机、ECMO的使用时机及使用时间等)以及死亡率等方面存在明显差别，也使各单位基于现有重度吸入性损伤诊断标准所开展的诊断与救治方面的基础与临床研究结果缺乏可比性和指导意义(Woodson LC.Diagnosis and grading of inhalation injury[J].J Burn Care Res,2009,30(1):143-145)。为了更加科学和准确的开展重度吸入性损伤发病机制、治疗方案以及伤后预测等方面的研究，申请人提出了将原有重度吸入性损伤进一步分层为严重、危重与极危重吸入性损伤的假设，并提出了构建不同层级严重吸入性损伤动物模型的方法。

发明内容

本发明要解决的技术问题是在原有重度吸入性损伤基础上提供了一种更加科学的细化的不同层级严重吸入性损伤动物模型的建立方法。该方法通过控制动物对同样压力和温度蒸汽的吸入时间，将重度吸入性损伤进一步分层为严重、危重与极危重吸入性损伤，方法简单易操作，建立的三个层级的严重吸入性损伤动物模型稳定可靠。

本发明所述的不同层级严重吸入性损伤动物模型的建立方法，其特征在于包括以下步骤：

1)麻醉动物，将动物固定于手术台上，解剖并显露右颈内静脉或左颈内静脉以及右股动脉或左股动脉，分别置入中心静脉导管和动脉导管，然后将中心静脉导管和动脉导管分别与监护仪连接；

2)在动物颈正中、环状软骨下行气管切开，插入气管导管；

3)在动物右颈内静脉或左颈内静脉注射维库溴铵，并按48～52ml/h输注乳酸钠林格氏液，待动物呼吸停止后，采用烫伤仪向动物气管内通入压力与温度分别为0.02MPa/cm²、105℃的蒸气，并按照0.25s、0.5s、1s的烫伤时间分别致伤动物，致伤后立即接呼吸机控制呼吸20min；在按48～52ml/h的量输注乳酸钠林格氏液1h后改按13～17ml/h的量继续输注乳酸钠林格氏液，即建立得到严重、危重与极危重三个不同层级严重吸入性损伤动物模型。

本申请中所述的动物是兔，优选采用新西兰大白兔。所有的动物在麻醉前需要进行建立烫伤模型前的常规准备工作，如先将动物各手术部位进行脱毛等处理。通常采用8％的硫化钠对动物进行脱毛，脱毛24h后进行麻醉操作。对动物进行麻醉所采用的方法与现有技术相同，本申请中的实验兔是采用1％戊巴比妥钠按60mg/kg体重进行腹腔注射。

上述方法的步骤1)中，在右颈内静脉或左颈内静脉中置入中心静脉导管(具体为双腔中心静脉导管)，在右股动脉或左股动脉中置入和动脉导管，所述的中心静脉导管和动脉导管分别通过监护仪上的相应连接线与监护仪连接，或者是分别通过压力换能器再与监护仪连接。以新西兰大白兔为例，优选是采用5F双腔中心静脉导管以及3F动脉导管。

上述方法的步骤2)中，所述的气管导管优选采用金属气管导管。气管导管内口径大小与动物的气管及呼吸机能够相互配合，以新西兰大白兔为例，优选是采用内径为5mm的气管导管。