[发明专利]一种新型二维光散射静态细胞仪方法及装置

权利要求书

1.一种新型二维光散射静态细胞仪装置，其特征是，包括激光光源，所述激光光源依次与中性密度滤光片及光学透镜及光纤耦合系统相连，光学透镜及光纤耦合系统调整激光，使光纤作为激发静态细胞样品安放装置上静态细胞的探针，静态细胞样品安放装置与二维光散射图样探测记录系统相连，二维光散射图样探测记录系统记录被测细胞的二维光散射图样并将该图样传送至分析系统。

2.如权利要求1所述的一种新型二维光散射静态细胞仪装置，其特征是，所述光学透镜及光纤耦合系统包括第一物镜，第一物镜与光纤耦合器相连，所述光纤耦合器与第一三维位移台相连，所述第一三维位移台通过光纤与第二三维位移台相连。

3.如权利要求1所述的一种新型二维光散射静态细胞仪装置，其特征是，所述激光光源发出的光依次穿过中性密度滤光片及第一物镜。

4.如权利要求1所述的一种新型二维光散射静态细胞仪装置，其特征是，所述静态细胞样品安放装置用于固定被测细胞样品，形成单层细胞悬液，包括两片载玻片、两片盖玻片和显微镜三维载物台，其中一个载玻片两端分别放置一片盖玻片，中间滴入样品，之后在上面盖上另一片载玻片，构成微通道，控制好样本浓度，形成单细胞薄层。

5.如权利要求1所述的一种新型二维光散射静态细胞仪装置，其特征是，所述二维光散射图样探测记录系统，用于记录被测细胞的二维光散射图样，包括第二物镜和CMOS探测器，通过第二物镜监测光纤探针的移动，移动光纤探针定位溶液中的细胞，保证激光垂直照射细胞，被测细胞被激光激发，形成分布于三维空间的散射光，散射光经过第二物镜后，被CMOS探测器探测并收集。

6.如权利要求1或3所述的一种新型二维光散射静态细胞仪装置，其特征是，所述激光光源采用二极管泵浦固体激光器，用于提供静态细胞样品安放装置上静态细胞的激发光源。

7.如权利要求2所述的一种新型二维光散射静态细胞仪装置，其特征是，所述光纤为直径125um、数值孔径0.22的光纤；所述激光光源产生的直径为1.0mm的激光光束；第一物镜：数值孔径为0.1的四倍物镜，第二物镜：数值孔径为0.25的十倍物镜。

8.如权利要求1-7任一所述的一种新型二维光散射静态细胞仪方法，其特征是，包括以下步骤：

步骤一：制作与待测物品相对应的液基芯片；

步骤二：打开激光光源，来自二极管泵浦固体激光器的准直光束，经过中性密度滤光片降低功率后由第一物镜汇聚，调整第一三维位移台，使其耦合进入光纤的一端；

步骤三：光纤的另一端作为探针插入静态细胞样品安放装置的微通道中，液基芯片被固定在显微镜平台上，通过第二三维位移台的控制，光纤探针对静态的待测物品进行二维扫描；

步骤四：通过第二物镜监测光纤探针的移动，移动光纤探针定位溶液中的待测物品，保证激光垂直照射待测物品，待测物品被激光激发，形成分布于三维空间的散射光，散射光经过第二物镜后，被CMOS探测器探测并收集；

步骤五：将CMOS探测器探测并收集的二维光散射图样传送至分析系统进行显示及分析。

9.如权利要求8所述的一种新型二维光散射静态细胞仪方法，其特征是，所述步骤四中，待测物品位于聚焦平面上时，CMOS探测器探测并收集的是待测物品图像；如果待测物品偏离焦平面，即“去焦”，那么观察到的就是待测物品的二维光散射图样。

10.如权利要求8所述的一种新型二维光散射静态细胞仪方法，其特征是，步骤五中首先模拟得到大量已知直径的待测样品模型的二维光散射图样，然后将模拟得到的二维光散射图样及经过步骤四得到的二维光散射图样进行水平扫描，得到灰度图像的变化曲线；对扫描得到的灰度曲线进行快速行傅立叶变换，FFT曲线中会出现典型主波峰，该典型主波峰为FFT曲线频率值由高到低沿横向轴的第一个波峰，这个典型主波峰的位置作为特征值来表示待测物品的尺寸；对大量模拟二维光散射图样的处理结果进行统计分析，由线性拟合得到波峰频率值随直径变化的直线方程；利用该直线方程，根据待测物品的波峰频率值，即可快速得到待测物品的直径及折射率的大小。