[发明专利]一种HPV检测试剂盒有效
| 申请号: | 201510026814.7 | 申请日: | 2015-01-19 |
| 公开(公告)号: | CN104561384B | 公开(公告)日: | 2019-06-25 |
| 发明(设计)人: | 李沛祥;李军;王倩;高源远;刘德斌;印思源 | 申请(专利权)人: | 镇江爱必梦生物科技有限公司 |
| 主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司: | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人: | 肖明芳 |
| 地址: | 212004 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 引物 试剂盒 检测 高通量样本 特异性水平 诊断 保守序列 分子检测 特异性强 应用探针 荧光染料 传统PCR 双链DNA 宫颈癌 种检测 可用 扩增 防治 检验 | ||
1.一种HPV检测试剂盒,其特征在于,包括如下引物及试剂:
第一类引物对:扩增出所有类型HPV基因组中保守序列的引物对,其核苷酸序列如SEQID NO:1~2所示;
第二类引物对:在同一管qPCR体系中检测出至少一种高危类型HPV的引物对;
所述的第二类引物对包括如下引物对:
(1) 扩增高危HPV 16、31、33、35、51、58、59和82型的引物对,其核苷酸序列如SEQ IDNO:3~4所示;
(2) 扩增高危HPV 18、39、45和68的引物对,其核苷酸序列如SEQ ID NO:5~6所示;
(3) 扩增高危HPV34和73型的引物对,其核苷酸序列如SEQ ID NO:7~8所示;
(4) 扩增高危HPV53、56和66型的引物对,其核苷酸序列如SEQ ID NO:9~10所示;
(5) 扩增高危HPV 26、67、69、70和85型的引物对,其核苷酸序列如SEQ ID NO:11~12所示;
(6) 扩增高危HPV 52型的引物对,其核苷酸序列如SEQ ID NO:13~14所示;
扩增阳性对照β-actinin基因的引物对,其核苷酸序列如SEQ ID NO:15~16所示;
该试剂盒还包括如下试剂:HPV液化液、DNA提取液、qPCR缓冲液、单链DNA结合蛋白、尿嘧啶-DNA糖基化酶、DNA聚合酶、聚合酶单克隆抗体、dNTP混合液、EvaGreen荧光染料;
其中,所述qPCR缓冲液的组成如下:KCl 500mM,Triton X-100 0.5%v/v,BSA 0.5mg/ml,MgSO4 7.5mM,Glycerol 17.0% v/v,(NH4)2SO4 5mM,Tris-SO4 150mM,pH为9.75;所述的DNA聚合酶为耐强碱性pH的DNA聚合酶;所述的dNTP混合液为将dATP、dGTP、dCTP和dUTP按照等摩尔数混合的水溶液;所述的聚合酶单克隆抗体为与DNA聚合酶特异性结合的单克隆抗体。
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