[发明专利]一种用于防控柑橘黄龙病的生物蛋白制剂及其制备方法

权利要求书

1.一种用于防控柑橘黄龙病的生物蛋白制剂，其特征在于：所述制剂的有效成分由NAC蛋白和吸水链霉菌代谢产物复配而成，NAC蛋白与吸水链霉菌代谢产物的质量比为1:1-50，所述吸水链霉菌代谢产物是由吸水链霉菌ACCC 40473经活化、发酵、细胞破碎、浓缩而成。

2.根据权利要求1所述的一种用于防控柑橘黄龙病的生物蛋白制剂，其特征在于：所述NAC蛋白由发酵毕赤酵母CGMCC 2.1838经菌体培养、细胞破碎、沉淀蛋白和喷雾干燥得到。

3.根据权利要求1所述的一种用于防控柑橘黄龙病的生物蛋白制剂，其特征在于：所述制剂的成分还包括载体硅藻土、高岭土或膨润土。

4.根据权利要求1所述的一种用于防控柑橘黄龙病的生物蛋白制剂，其特征在于：所述制剂的成分还包括助剂十二烷基苯磺酸钠或十二烷基硫酸钠。

5.一种用于防控柑橘黄龙病的生物蛋白制剂的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

① 选取吸水链霉菌ACCC 40473菌种经活化、扩大培养及发酵罐培养至菌体浓度达60-80%时停止发酵，获得吸水链霉菌；

② 将①中所得吸水链霉菌进行细胞破碎，浓缩去除70-90%体积的水分，得浓缩发酵液；

③ 以质量份数计，称取浓缩发酵液20-40份，NAC蛋白1-1.5份，载体20-30份，助剂5-8份，混合均匀，干燥，粉碎，得用于防控柑橘黄龙病的生物蛋白制剂粉末。

6.根据权利要求5所述一种用于防控柑橘黄龙病的生物蛋白制剂的制备方法，其特征在于，所述步骤①中菌种活化采用固体平板培养，培养基成分为硝酸钾1g、磷酸氢二钾0.5g、氯化钠0.5g、硫酸亚铁0.01g、玉米淀粉20g、硫酸镁0.5g、琼脂20g、水1L，pH 7.0，经121℃灭菌30min，冷却后采用划线法接种，于28℃恒温培养48h得活化的菌种；扩大培养采用摇瓶液体培养，培养基成分为硝酸钾1g、磷酸氢二钾0.5g、氯化钠0.5g、硫酸亚铁0.01g、玉米淀粉20g、硫酸镁0.5g、水1L，pH 7.0，经121℃灭菌30min，灭菌后常温冷却，挑取活化的菌种接入摇瓶，于恒温摇床上以转速200rpm、28℃培养48h，作为发酵罐种子液；将发酵罐种子液转至发酵罐进行发酵，接种量为1%，条件为温度28℃、转速200rpm、通气量1：1，发酵罐培养基成分比例为硝酸钾1g、磷酸氢二钾0.5g、氯化钠0.5g、硫酸亚铁0.01g、玉米淀粉20g、硫酸镁0.5g、蛋白胨10g、豆粕粉5g、水1L，pH为7.0，经121℃灭菌30min，灭菌后冷却至28℃。

7.根据权利要求5所述一种用于防控柑橘黄龙病的生物蛋白制剂的制备方法，其特征在于，所述步骤③中载体为硅藻土、高岭土或膨润土。

8.根据权利要求5所述一种用于防控柑橘黄龙病的生物蛋白制剂的制备方法，其特征在于，所述步骤③中助剂为十二烷基苯磺酸钠或十二烷基硫酸钠。

9.根据权利要求5所述一种用于防控柑橘黄龙病的生物蛋白制剂的制备方法，其特征在于，所述步骤③所得生物蛋白制剂粉末粒度为80目-200目。