[发明专利]以生物样品进行的针对IGFBP7的具有改进的性能的测定

说明书

本发明提供特别是在用于评估肾损伤时具有改进的临床性能的IGFBP7免疫测定。所述免疫测定依赖于对在用于诸如生物流体的复杂临床样本中时，并且特别是在用于诸如侧向流动测试装置的快速测定形式中时展现改进的测定性能的抗体和抗体对的选择和使用。

相关申请的交叉引用

本申请要求2013年11月6日提交的美国临时申请号61/900,942以及2014年9月23日提交的美国临时申请号62/054,324和2014年10月15日提交的美国临时申请号62/064,380的权益，所述美国临时申请各自据此以包括所有表格、附图和权利要求的方式整体并入本文。

背景

以下对发明背景的讨论仅被提供以帮助读者了解本发明而非被承认描述或构成本发明的先前技术。

IGFBP7(人前体Swiss Prot条目Q16270)是一种涉及调控胰岛素样生长因子在组织中的表达，并且调节IGF结合它的受体的分泌蛋白质。据报道它也刺激前列环素产生和细胞粘附。IGFBP7通过IGF非依赖性机理抑制前列腺癌和乳腺癌细胞系的生长和集落形成，此导致细胞周期的G1期延迟和凋亡增加。IGFBP7在广泛范围的正常人组织中表达，并且它通常显示在前列腺、乳腺、结肠和肺来源的癌细胞系中的表达降低。

此外，各自据此以引用的方式以包括所有表格、附图和权利要求的方式整体并入本文的WO2011/097539和WO2011/075744描述IGFBP7个别地以及于各组多标志物中用于评估受试者的肾状态的用途。具体地，显示通过免疫测定测量的IGFBP7水平与对肾状态的风险分层、诊断、分级、预测、分类和监测相关联。

从诸如免疫测定的特异性结合测定获得的信号是在一种或多种结合物质(例如，抗体)与含有抗体结合所必需的表位的靶标生物分子(即，分析物)和多肽之间形成的复合物的直接结果。免疫测定常常能够“检测”分析物；但因为抗体表位约为8个氨基酸，所以被配置来检测目标标志物的免疫测定也将检测与标志物序列相关的多肽，只要那些多肽含有为结合用于测定中的一种或多种抗体所必需的表位即可。尽管此类测定可检测全长生物标志物，并且测定结果可表示为目标生物标志物的浓度，但由测定获得的信号实际上是样品中存在的所有此类“免疫反应性”多肽的结果。此类结合测定也可检测生物样品中存在的与诸如结合蛋白、受体、肝素、脂质、糖等的其它物质复合的免疫反应性多肽，前提是那些其它物质不干扰结合物质与靶标生物分子之间的结合。通常，然而，特异性结合测定是使用纯化的分析物制定，并且未考虑复合物形成和片段化样式。这在此类其它结合物质的身份未知时尤其确切。

发明概述

本发明的一个目标在于提供特别是在用于评估肾损伤时具有改进的临床性能的IGFBP7免疫测定。具体来说，我们描述对在用于诸如生物流体的复杂临床样本中时，并且特别是在用于快速测定形式中时展现改进的测定性能的抗体和抗体对的选择和使用。

在第一方面，本发明涉及一种特异性结合人IGFBP7，并且适用于夹心式免疫测定中的单克隆抗体。所述抗体特异性结合由LIWNKVKRGHYGVQRTELLPGDRDNL(SEQ ID NO:1)或SSSSSDTCGPCEPASCPPLP(SEQ ID NO:2)组成的多肽。

在一相关方面，本发明涉及一种特异性结合人IGFBP7，并且适用于夹心式免疫测定中的抗体对，所述抗体对包含特异性结合由LIWNKVKRGHYGVQRTELLPGDRDNL(SEQ ID NO:1)组成的多肽的第一单克隆抗体和特异性结合由SSSSSDTCGPCEPASCPPLP(SEQ ID NO:2)组成的多肽的第二单克隆抗体。

在另一相关方面，本发明涉及一种特异性结合人IGFBP7，并且适用于夹心式免疫测定中的单克隆抗体。所述抗体特异性结合IGFBP7的构象表位。构象表位由IGFBP7蛋白中在序列上不连续，但在三维空间中靠近在一起的残基形成。以下描述此类抗体的实例，被称为1D6。