[发明专利]高密度脂蛋白中的胆固醇测定方法和该方法中使用的试剂

说明书

本发明提供即便将像血脂异常症这样的特殊病症的检体作为测定试样时，也能够提高与DCM等基准测定法的测定值的一致性的HDL－C测定方法。将测定试样与胆固醇酯水解酶和胆固醇氧化酶、或者胆固醇酯水解酶和胆固醇脱氢酶在下述通式(I)(式中，R¹表示直链或支链状的碳原子数8～22的烷基、或者直链或支链状的碳原子数8～22的烯基，R²、R³以及R⁴相同或不同地表示直链或支链状的碳原子数1～6的烷基、或者直链或支链状的碳原子数2～6的烯基，X^‑表示阴离子。)表示的化合物和聚阴离子的存在下反应，测定HDL－C。

技术领域

本发明涉及简便且精确地测定高密度脂蛋白中的胆固醇的方法和该方法中使用的试剂。

背景技术

作为生物体主要的脂质的胆固醇、中性脂肪(以下，有时称为甘油三酯或者TG)和磷脂在血液中与载脂蛋白一起形成脂蛋白而存在。该脂蛋白，根据物理性状的不同，分为乳糜微粒、极低密度脂蛋白(以下，有时称为VLDL)、低密度脂蛋白(以下，有时称为LDL)、高密度脂蛋白(以下，有时称为HDL)等。已知其中的HDL因为从生物体中的各组织接受胆固醇，关系到积蓄在细胞内的胆固醇的除去作用，是以冠状动脉硬化症为代表的各种动脉硬化症的危险预防因素。因此，HDL中的胆固醇(以下，有时称为HDL－C)的血中浓度的把握，对动脉硬化性疾病的发病预知有用而在临床上广泛测定。

作为HDL－C的测定方法，不需要将测定试样中的HDL与HDL以外的脂蛋白分离分级的工序，分类为所谓的均相HDL－C直接测定法(以下，有时称为以往方法)的临床检查用的试剂大量市售，从而在程序检查中使用(非专利文献1、4)。然而，这些实用化的临床检查用的方法·试剂也有测定精度方面的问题，特别是在血脂异常检体中，以基准测定法(非专利文献2、3)测定时的测定值与用各种试剂测定时的测定值的背离在国际上也一直是问题(非专利文献4)。

许多以往方法可以分类为在HDL－C测定前，将HDL以外的脂蛋白中的胆固醇的全部或者一部分从反应液中消除以使得其不参与HDL－C测定的主反应(以下，有时简称为主反应)的方法(例如，专利文献1、2)；或者，在HDL－C的测定时，HDL以外的脂蛋白中的胆固醇抑制HDL以外的脂蛋白中的胆固醇的反应以使得其不参与HDL－C测定的主反应的方法(例如，专利文献3～6)，该以往方法中，概括为HDL以外的脂蛋白VLDL与LDL的性状并不相同，因此由VLDL引起的测定误差的消除成为课题。

现有技术文献

专利文献

专利文献1:国际公开第98/26090号小册子

专利文献2:国际公开第2000/078999号小册子

专利文献3:国际公开第95/24502号小册子

专利文献4:国际公开第2004/035816号小册子

专利文献5:国际公开第2005/100591号小册子

专利文献6:国际公开第2006/118199号小册子

非专利文献

非专利文献1:Clinical Chemistry 47：9 1579－1596(2001)

非专利文献2:European Journal of Clinical Chemistry and ClinicalBiochemistry 29 269－275(1991)

非专利文献3:Clinical Chemistry 45：10 1803－1812(1999)

非专利文献4:Clinical Chemistry 56：6 977－986(2010)

发明内容