[发明专利]尿样中乙酰金刚烷胺的检测和定量

说明书

一种定量尿样中乙酰金刚烷胺的方法，该方法包括使用固相萃取从尿样中洗脱乙酰金刚烷胺以及使用拉曼光谱定量从尿样中洗脱的乙酰金刚烷胺。

背景技术

技术领域

本发明涉及生物标记的检测和定量，尤其涉及尿样中乙酰金刚烷胺的检测和定量。

相关技术说明

液相色谱质谱已被成功用于检测和定量生物样品，诸如尿中极其低含量的乙酰金刚烷胺。如于2004年11月4日授权给Sitar等人的美国专利号6,811,967中所公开的，这可促进处于早期的癌症的诊断，因为对包括金刚烷胺的亚精胺/精胺N¹-乙酰转移酶(SSAT)的乙酰化形式的定量可用于检测包括癌症的各种病理状态，其全部公开内容通过引用并入本发明。然而，利用液相色谱质谱检测和定量乙酰金刚烷胺是相对耗时和高成本的。因此，需要一种高效且成本节约的方法来检测和定量乙酰金刚烷胺，从而允许快速经济的测试。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种改进的检测和定量尿样中乙酰金刚烷胺的方法。

相应地，提供了一种定量尿样中乙酰金刚烷胺的方法。该方法包括使用固相萃取从尿样中洗脱乙酰金刚烷胺，并使用拉曼光谱定量从尿样中洗脱的乙酰金刚烷胺。

固相萃取可包括用甲醇洗脱乙酰金刚烷胺。使用拉曼光谱定量从尿样中洗脱的乙酰金刚烷胺可包括基于底物的、表面增强拉曼光谱的使用。

此处公开的方法基于尿样中乙酰金刚烷胺的定量，可用于对患者进行病理状态的筛选。此处公开的方法基于尿样中乙酰金刚烷胺的定量，还可用于对患者进行癌症的筛选。

此处公开的方法可用于在低成本下检测和定量乙酰金刚烷胺。

附图说明

通过以下给出的具体实施方式的描述，仅以实施例的方式，并参照附图，本发明将更容易理解，其中：

图1显示了包被在表面增强拉曼散射(SERS)底物上的甲醇液滴中的乙酰金刚烷胺露天蒸发和缓慢蒸发的结果；

图2显示了使用SERS底物的乙酰金刚烷胺的定量；

图3显示了甲醇中不同浓度的乙酰金刚烷胺的拉曼光谱；以及

图4显示了基于图3中的拉曼光谱的校准曲线。

具体实施方式

此处公开的是使用拉曼光谱来鉴定和定量尿样中的乙酰金刚烷胺，一种亚精胺/精胺N¹乙酰转移酶(SSAT)代谢的产物。尿液是许多盐、极性代谢物和多种非极性类固醇的浓缩溶液。在尿样中，预期的乙酰金刚烷胺的浓度比金刚烷胺的浓度小约1000倍。金刚烷胺和乙酰金刚烷胺的区别是基于在大约1600cm^-1波数处羧基的振动谱带。金刚烷胺和乙酰金刚烷胺的光谱之间还有一些其他的差别，但是，这一个拉曼谱带是特别关注的，因为它仅出现在乙酰金刚烷胺光谱中。

制备尿样，并用固相萃取(SPE)分离尿样中的不同成分。相应地，尿样使用固相萃取进行预处理，用以在使用拉曼光谱鉴定和定量存在于尿样中的乙酰金刚烷胺之前去除杂质。

尿样

包括以下尿液成分NaCl 8.00g/L、KCl 1.64g/L、K₂SO₄2.63g/L、尿素13.40g/L以及肌酸酐1.50g/L的人工尿液被用于制备具有皮质酮16.7mM、金刚烷胺3.3mM和乙酰金刚烷胺3.3uM的尿样。

固相萃取(SPE)：